答:老师:
您好,我在做水稻组培.最近不知为什么,NB诱导的水稻愈伤经过继代后,老是褐变,而且还有的变白感觉要分化,很少看见米黄色的健康胚性愈伤,因为赶时间,急需求救!望老师或高手指点,是不是培养基哪个环节出了什么问题呀?
盼速回信,多谢了!您好!由于假期没有及时回复,请见谅!胚性愈伤的诱导还原态氮的存在至关重要,建议用NH4CL为氮源,细胞中含有的NH4离子数量达不到临界值就很难形成胚性愈伤。另外建议采用2,4-D诱导。
褐化的主要原因是细胞释放的多酚类物质积累并被氧化为醌类物质,这是细胞自身保护措施之一,却严重影响着细胞的分裂与生长发育。为防止褐变,可加入VC、GSH等抗氧化剂,或添加吸附剂如PVP、药用炭等。