1、根的发生过程  

植物离体培养根的发生都来自不定根。据报道根的形成从形态上可分为两个阶段，即形成根原基和根原基的伸长及生长。前一阶段根基的形成包括第一次、a二次细胞横分裂和第三次细胞纵分裂，细胞横分裂能够被生长素促进。据测定，根原基的启动和形成约历时48h。后一阶段为细胞快速伸长阶段，大约需24h-48h。由于以上情况，不定根形成的不同阶段，要求不同。根原基的形成和生长素有关，根原基的伸长和生长则可以在没有外源生长素下实现。一般从诱导至开始出现不定根时间，快的只需3-4d，慢的则要3-4周。

植物组织培养中，关于根的发生规律研究的还不够，尤其是在木本植物培养中，往往芽易诱导并且生长良好，而根则难发生（例如牡丹），故应当加强这方面的研究。

2、影响试管内生根的因素

 影响植物离体培养中生根的因素很多，有离体材料自身的生理生化状态，也有外部的多种因素。

（1）植物材料  不同植物、不同基因型、同一植株不同部位和不同年龄对分化根都有决定性的影响。生根难易还与母株所处的生理状态有关，因为取材季节和所处环境条件均有影响。在不同种桉树生根试验中完全证明了这一点。所以试管内若不生根，不要完全从培养中去找原因，也应在取材时考虑。不同植物生驳囊话愎媛墒牵耗颈局参锉炔荼局参锬眩成年树比幼年树难，乔木比灌木难。

（2）基本培养基  大多数使用低浓度的MS培养基，其中不少使用1/2MS和1/3MS培养基。如许智宏等在无籽西瓜生根中，用不同浓度的MS培养基（用MS、1/2MS和1/2MS无机盐加铁盐）进行生根对比，结果降低无机盐浓度，有利于生根，而且根多而粗壮，发根也快，加铁盐则更好。水仙的小鳞茎在1/2MS培养基下才生根。

矿质元素对生根的影响也有一些报道。大量元素中有人认为NH₄⁺多可能不利于发根，生根需要磷和钾元素，但不宜太多；而Ca²⁺多数报道有利于根的形成和生长。

糖的浓度n生根培养时通常使用的是蔗糖，其浓度多数采用低浓度，一般在1%-3%。如桉树的不定枝发根最适蔗糖浓度为0.25%，马铃薯发根为1%。但也有些植物在高浓度时生根较好，李明军等（1998）在怀山药试管繁殖中发现3%-9%的蔗糖浓度均能诱导生根，但6%时根粗而发达。

（3）植物生长调节剂  生根培养中使用激素的情况，据报道单用一种生长素的占51.5%，生长素加激动素占20.1%。按外植体类型归类统计，愈伤组织分化t时，使用萘乙酸最多，浓度在0.02-6.0，以1.0-2.0为多。使用吲哚乙酸+激动素的浓度范围分别为0.1-4.0和0.01-1.0，而以1.0-4.0和0.01-0.02居多数。而胚轴、茎段、插枝、花梗等材料分化根时，使用吲哚丁酸居首位，浓度为0.2-10，以1.0为多。可见生根培养多数使用生长素，大都以吲哚丁酸、吲哚乙酸、萘乙酸单独用或配合使用，或与低浓度激动素配合使用。萘乙酸与细胞分裂素配合时摩尔比在（20-30）：1为好。由此可见，在不定根形成中，植物激素起着决定性作用，生长素都能促进生根。一般赤霉素、细胞分裂素、乙烯通常不利于发根，如与生长素配合，一般浓度宜低于生长素浓度。脱落酸（ABA）可能有助于发根。植物生长延缓剂如多效唑（MET对不定根的形成也有良好的作用，在诱导生根中所使用的浓度一般为0.1-4.0