满天星(Gypsophila paniculata L.)
有效的培养方法
1、培养基配方
诱导培养基 MS+BA 1mg/L+KT 2mg/L+NAA 0.3mg/L+IAA 0.2mg/L。
增殖培养基 MS+BA 1mg/L+IAA 0.2mg/L。
生根及壮苗培养基 1/2 MS+NAA 0.3mg/L+IAA 0.2mg/L。
2、培养程序
(1)取材 从健壮的植株上切取营养生长阶段的嫩茎,去掉叶片,切成1~1.5cm带芽的节段。
(2)灭菌 用自来水加适量洗衣粉将外植体清洗干净,然后将节段用0.1%升汞溶液加吐温2~3滴,灭菌20min,不停地摇动,在无菌条件下切去节段两端的损伤组织,再在1%~2%的次氯酸钠溶液中灭菌20min后,用无菌水浸洗3次,每次5min。在超净工作台上切取1cm的茎段接种在诱导培养基中。
(3)生长及分化 外植体经6~10d左右培养后,顶芽开始生长,且腋芽萌动,基部有愈伤组织产生,继续培养便逐渐形成丛生芽。将形成的芽丛转接到增t培养基上,过5~20d培养,可长出新增繁殖芽。如此不断转接增殖,在族丛生芽继代一次可繁殖再生植株15~20个。
(4)壮苗及生根培养 增殖培养的芽丛经15~20d培养,长至2~3cm时,可将其切为单株转接于生根培养基中,7d后切口稍膨大并出现白色突起,形成根原基,10d左右陆续有白色根系形成,即可进行移栽。
质量标准及调控0术
满天星出瓶苗的质量标准为株高2~3cm,具两对叶,叶色绿,苗粗壮,根系良好或有明显的根原基,无玻璃化和半玻璃化症状。
根据瓶苗在培养中的生长情况,可从激素浓度、温度、光照时间、琼脂浓度、通风条件等几个方面进行调控。满天星在规模化组培快繁中,经常出现的玻璃化现象给生产造成极大损失,为减少玻璃化现象的发生,在长期的工作实践中摸索出的一些办法如下。
(1)培养基的配制 琼脂用量要适当,不能过软或过硬,适当增加糖浓,在继代培养时减少细胞分裂素的含量。
(2)培养温度及光照 温度应控制在25~27℃,光照时间控制在8~12h/d,光照强度为1500~2000lx。根据培养室内的温度,调整培养瓶在培养架上的摆放位置,增殖培养适宜摆放在1~3层(由下至上),生根培养宜放在3~6层。
(3)通风条件 在培养期间要保证足够的气体交换,对培养物应及时转接,培养周期不宜过长,培养瓶在培养架上成行摆放,保证足够的采光。
(4)接种时使用锋利的刀片 在接种操作过程中,要尽量减少对转接苗的机械损伤。
出瓶苗的过渡管理
揭去封口膜,用镊子轻轻地将植株取出,用清水洗净根部黏附的培养基,放入杀菌剂中浸泡片刻,栽入装有珍珠岩和腐叶土混合基质的塑料箱中并浇水,覆盖塑料薄膜,避免阳光直射,注意保温保湿。瓶苗移栽3d内,应注意保证小苗的水分供应。培养瓶中的小苗生长在湿度较大的环境中,茎、叶均无角质层,经受不住阳光照射,在瓶苗炼苗开始时,除遮荫外,还应注意在气温较高,空气干燥时,进行小苗叶面喷水,提高空气湿度,使叶面的蒸腾减少,尽量接近培养瓶中的条件,使小苗始终保持挺拔的姿态。炼苗3d后,应逐渐增加光照时间,一般早、晚露苗,中午前后适当遮荫。同时随时注意小苗叶面变化,适时喷水。移栽3d后浇一次营养液,以后每隔一周左右浇一次,约10d左右,苗已生根,即可移栽上袋,二周后即可成苗,成活可达95%以上。