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洋桔梗(Eustoma russellianum)
发布时间:2019-08-05

有效的培养方法

1、培养基配方

诱导培养基  MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L

增殖培养基  MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L

生根培养基  1/2 MS+NAA 0.6mg/Lo

2、培养程序

1)取材  从田间选取开花效果好、抗性强、植株长势健壮的小侧芽、叶片作为组培材料。在选材时要注意在花色纯正、无病虫危害、叶色浓绿的开花株上进行,特别是洋桔梗的复色花比较多,其各种颜色所占的比例在同一品种间也会有较大的差异,在进行打芽母株的选择时,最好在一株上采集外植体,以防止组培种苗栽培到开花后出现花色不均一。

2)灭菌  用洗衣粉漂洗干净后,用流动的清水冲洗,并置75%的酒精中浸泡1min,再用0.1%的升汞浸泡15min取出,在无菌工作台上,放入加3滴吐温的8%次氯酸钠溶液浸泡10min,再用无菌水漂洗2次后,将叶片分切为0.6cm2小块,茎段则分切成1cm的小段(带腋芽的茎段要去掉抱茎的大叶片),并把茎的断面再切去一小段,以减少灭菌药物的毒害。将它们分别置放于诱导培养基中进行培养。

3)生长及分化  4~5d后,无论是顶芽和侧芽都会开始萌动,在茎段腋芽部位长出侧芽。接种1周后,顶芽、侧芽和茎段上的腋芽开始生长,并进一步成丛生状芽。在茎基部也会0生愈伤组织。叶片的切口部位和四周逐渐形成黄绿色愈伤组织,并分化出小芽点。2周后,侧芽有1.5~2.0cm长,由侧芽长成的植株上,又长出侧芽。同时顶芽、侧芽和茎段基部愈伤组织上的小芽点也在长大,渐渐形成一团团的丛生0。30d后叶片的边缘部位开始分化出不定芽,少量叶片的叶面上也会有不定芽的直接分化。将丛生芽剥离成单芽。对长得较高具有三至四个茎节的单株,可以切分为2~3段。它们都可以作为继代材料接种到繁殖培养基中进行增殖培养0

4)生根培养  将健壮的单株苗接种于生根培养上,经20d左右,生根率可达100%。根呈黄绿色、放射状,平均每株可生根5~10条,当苗高2cm左右时,即可出瓶进行过渡移栽。

洋桔梗出瓶苗的质量要求为,植株植型正常,叶片绿色对生,单株不丛生,苗高2~3cm,具2~3个茎节,茎杆粗壮,根系发达(长度以0.5~1.0cm为宜),有5~6条以上的粗壮根系。

在洋桔梗的组培快繁中,用叶片作为外植体进行诱导培养时,增加BA浓度会使幼叶组织块愈伤组织量及芽的数量随之增s,而NAA浓度的增加,上述效应反而下降,因此少加甚至不加NAA有利于叶片愈伤组织的形成和新芽的发生。BA的用量与丛生芽的数目有很大关系,浓度愈高,分化芽愈多,但随着浓度的提高,极易形成s璃化苗,还会出现明显的变异,突出表现为茎干变扁,叶片簇生于其上,呈扫把状。所以增殖培养基中的浓度配比BA最好不超过0.5mg/L,这样既能使它保持6~8倍的增殖率,又能使新生苗生长正常,叶s舒展宽大,叶色深绿,节间正常。而玻璃化苗的发生和弱光照、低温条件有很大关系。一般繁殖苗30d需继代一次,才可正常增殖,从增殖体上切下转入继代培养的苗以0.5cm为宜,太长、太短都会影响其生长周期,影响繁殖苗的整s度。用于生根的苗必须是2cm以上,具有2个节的健壮苗。



出瓶苗的过渡管理

将生根苗从瓶中取出,洗去琼脂,栽入珍珠岩与腐殖土按2:1混合的基质中,在20~26℃进行过渡培养。在移栽初期要注意遮荫和保湿,定时喷雾保湿,以后逐渐增加光照并适当控制喷水,每周喷11/2MS(不含有机物)的营养液一次,洋桔梗组培苗成活率可达80%~90%1个月后再移栽到珍珠岩、园土的配比为15的袋中,每周浇1次营养液,并定时喷水,注意病虫害防治。当苗长到4对叶时,将苗和基质一起从袋中取出移到大田定植,经过适宜的温度、水分、营养管理及病虫害防治,组培苗的定植成活率可达到95%以上。


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