（二）有效的培养方法

1、培养基配方

花蕾诱导培养基  MS+BA 10mg/L+IAA 0.5mg/L。

叶片诱导培养基  MS+BA 5mg/L+NAA 0.2mg/L。

增殖培养基  MS+BA 0.2~1mg/L+KT0.3mg/L+NAA 0.2mg/L。

生根培养基  1/2 MS+NAA 0.1mg/L。

2、培养程序

（1）取材  首先要选择花大、花色艳丽、市场流行的品种，然后再选择无病虫害、植株生长健壮、花色纯正的优良单株进行取芽。一旦选出优株后，应进行挂牌标记，并一直在其上采取花蕾。作为外植体的花蕾要选直径在1cm左右，而且未露心的小花蕾，太大或是太小的花蕾均不能获得满意的效果。

（2）灭菌  将外植体剥去外层萼片，在自来水下冲洗干净，然后在无菌条件下放入0.15%的升汞溶液中浸沟15min，取出后剥去外部所有萼片。在1%的次氯酸钠溶液中消毒10min，放入无菌水中充分洗涤3次。在整个灭菌和清洗的过程中，要不断摇动瓶子，使灭菌和漂洗均匀彻底。如果是花蕾太大已经张开露心或者是本身花蕾很小就会张开的品种，灭菌的难度更大，张开花蕾容易污染，而太小的花蕾容易在灭菌过程中造成内部组织死亡。

（3）生长及分化  将灭菌后的花蕾外植体接种于诱导培养基上，进行诱导培养。20d后在花托基部开始产生愈伤组织，将伸长的花丝拨去，并将带愈伤组织的花托分切成小块，在诱导过程中每隔20~30d转接一次。从花托诱导出不定芽起码需2个月的时间，多数品种要3~5个月才会出芽，有少数品种甚至经过半年的不断转接和培养，仍然没有不定芽分化的迹象。非洲菊不同的品种再生时间和方式并不完全一样，有的品种直接从花芽上分化出不定芽，有的则要先从花芽分殖鲇伤组织，然后再脱分化出不定芽。由于整个诱导过程较长而且复杂，在培养过程中会因培养基和环境条件稍有不适，而出现花芽和愈伤组织褐化死亡和污染，最终导致组培失败。

由于从花托上分化出不定芽的几率比较小，一旦有芽从托上产生，就要及时从花托上分割下来进行快速扩繁。芽最初的扩繁培养基可用MS+BA 3~5mg/L+NAA 0.2mg/L，增殖系数可以达到10倍以上。经过3个月左右的扩繁，繁殖基数一般能达到月生产2~3千组培苗的生产量基数。也可以将芽的叶片带柄切下，接种于培养基（MS+BA 5mg/L+NAA 0.2mg/L）中，1个月后在叶柄基部会产生许多丛芽，这些丛芽又可以进行芽的增殖，这时可将培养基调整为MS+BA 0.2~1mg/L+KT 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L，否则小芽过多，难以分株进行生根，且生根后容易出现丛生苗，严重影响种苗的开花和开花的质量。原则上在进行扩繁及继代时，要根据各个品种的表现来确定细胞分裂素钟玫闹掷嗪团ǘ取Ｒ话阆赴分裂素浓度太高，组培苗的叶片又嫩又脆容易脱落，且边缘具有深的锯齿状裂刻，不易分株；细胞分裂素浓度过低，则会导致繁殖系数太低，难以维持正常的生产量。所以在激素的使用上，既要考虑种苗质量又要保证一定的增殖系数，才能在较低的成本下，维持殖５纳产。

（4）生根培养  不定芽经过扩繁和继代培养后，达到可维持一定生产量的繁殖基数时，便可在每次继代时将苗高2~3cm的单株切下，接入生根培养基进行生根培养。7~8d后，小苗基部会长出3~5条不定根，12~15d就可以出瓶，生根率可达到95%以上。