试管苗增殖与培养条件如温度、光照、湿度、培养器皿和培养基的pH值密切相关，需要进行控制，以促进繁殖。
（1）温度  不同植物增殖的最适温度不同，大多采用25±2℃的温度。一般低于15℃时，培养的组织生长出现停滞，而高于35℃对生长也不利。促进芽的形成温度略低，如烟草芽形成以18℃最好，12℃以下，33℃以上成芽率均低。增殖苗的温度一般是恒温，也有昼夜变温下生长效果比恒温好的，如百合。在考虑某种培养物的温度要求时，也应考虑原植物的生态环境所处温度条件，如松树一般生长在较高的海拔及较低的温度环境，在较高温度的培养条g下其试管苗生长变慢，有人采用两到三个月的模拟冬天的低温环境，又使生长恢复。温度预处理也对试管苗增殖有影响。高温处理不仅可获得无病毒植株，也影响到器官发生。草莓的茎尖分生组织经38℃处理3d～5d，提高了无病毒茎尖分生组织的成活率。天竺葵一个品种分别用10℃、20℃g30℃等不同温度处理1～4周，培养8周后，以10℃处理的茎尖繁殖数最高，20℃处理的其次，30℃处理的最差，在木本植物的胚培养中，发现胚在2-5℃条件下进行一定时间的低温处理，有利于提高胚的成活率，如桃。
（2）光照  光对试管苗生长增殖也有明显影响，表现在光g、光质和光周期等方面。光照强度对细胞、组织的增殖和器官的分化研究尚少，因此看法不一致。在一些植物（如荷兰芹等）的组织培养中，发现器官形成不需要光；而另一些植物（如菊芋、卡里佐枳橙）的组织培养中，则发现光对器官的形成有重要作用。据报道用黑暗、2200lx和5700lxg不同光照处理卡里佐枳橙的茎尖培养，茎尖分化新梢数随着光强增加而增加，分别增加153.8%和238.5%。吴绛云发现光照显著促进黑穗醋栗幼苗的增殖。而王际轩等培养苹果砧木的芽，通过暗培养产生黄化苗，明显提高茎尖增殖率。
关于光周期，试管苗的增殖与分化，许多研究者g选用一定光周期来培养，最常用的光周期是16h光照，8h黑暗。有人发现菊芋块茎器官的分化，每天1h600lx光照有促进，到12h达最高限度，再增加则无作用。曹孜义等用连续光照培养葡萄试管苗，绝大多数品种可加快苗的增殖，而且使苗生长健壮。王永明发现一月以上每日10h以下光照，g使部分苗生长停止和封顶，若延长至12h～16h，则可消除。如果诱导试管内花的形成，那日照长短则是一个重要因素。
（3）湿度  培养容器内的相对湿度几乎可达100%，而环境中的湿度会影响培养基湿度，培养室温度太低，培养基易失水、干裂，影响生长，过高则易引起棉g长霉，造成污染。一般要求在70%～80%的相对湿度，过低应洒水，过高应通风除湿。
（4）培养基的PH值  试管苗的增殖都要一定的PH值。如果PH值不适，则直接影响试管苗对营养物质的吸收，从而影响到生长和繁殖。除特殊要求外，一般培养基PH值都在5.6～6.0之间。
（5）气体的影响  试管苗生长和繁殖需要氧气。进行固体培养时，如果瓶塞密闭或将芽埋入培养基会影响生长和繁殖。液体培养，则需进行振荡和旋转或浅层培养以解决氧气供应。试管苗增殖培养时，应注意避免有害气体的进入，如SO2、乙烯等的伤害。