二、有效的培养方法

1、培养基配方

诱导培养基  MS+BA 5mg/+NAA 0.05mg/L。

增殖培养基  MS+BA 2mg/L+NAA 0.01~0.05mg/L。

生根培养基  1/2MS+NAA 0.05mg/L+IBA 0.05mg/L。

2、培养程序

（1）取材及灭菌  取栀子花新枝的嫩梢，剪除叶片，在y来水下冲洗干净，再用0.1%升汞溶液浸泡消毒10min，用无菌水洗4~5次后，将枝条切成0.5~1.0cm的茎段，节段插入诱导培养基中。

（2）生长及分化  外植体在诱导培养基上培养3周左右，则有腋芽相继启动或伸出，同时茎段的节部膨大，并有5~6个不定芽的t生；将形成的芽分切成带有2~3个芽的小块转入继代培养基中培养，芽块的顶芽生长，20d后，其基部节处出现5~10个小芽，每一芽块都可形成2~3个芽丛；继续培养，小芽会伸长且茎杆变粗，叶片宽大，色绿。

（3）生根培养  当芽长到至少有2~3节时，可将其从茎基部切下，成单株进行生根培养，一般10d后有60%的苗开始发根，20d后100%发根，每株根数2~7条，平均根长2cm。此时即可出瓶移栽。

三、质量标准及调控技术

在栀子花的组织培养过程中发现，所取外植体季节的差异，对芽的诱导有一定的影响。一般在春夏之交，正值栀子花生长季节，芽的分化能力较强；而早春及秋季的芽是处于或接近休眠的材料，本身的抗菌能力差，产生灭菌困难，并且茎段腋芽的萌发率较低，在培养过程中虽经多次转代，但最终培养失败。

在试验中发现，将起始外植体在NAA 0.5mg/L和BA 0.2mg/L的作用下，使腑芽得到启动，然后转入BA 5mg/L和NAA 0.05mg/L的培养基中，外植体分化增殖芽的能力有明显提高。在栀子花的增殖培养中，适宜浓度的生长素起协调作用，腋芽需要一定浓度的生长素才能启动生长，但是高于0.1mg/L的NAA与BA作用时，则会影响丛生芽增生的效果。在生根培养中，生长素是必要的，并且把握好生长素的浓度尤为重要。试验表明，一定浓度的NAA促使生根快、根数多，但浓度达到0.1mg/L时，基部的愈伤组织生长旺盛，根的生长受抑。NAA和IBA的浓度在0.05~0.10mg/L的同时作用下，对促使栀子花组培苗根的伸长起到了较明显的效果。

另据报道，栀子花的组培苗生根，NAA浓度以0.2mg/L最佳，浓度过高或过低均不利于根系的生长（李彬2000）。结论的不同可能与所t养的栀子花品种的不同有关。

四、出瓶苗的过渡管理

将生长20d左右的具根小苗从培养基中取出，用自来水洗净，然后移入沙钵中。保持20~30℃的温度条件。栀子花较耐荫，湿度的控制较为重要，必须保持90%~95%的湿度。一般移栽一个月后，心叶见长，且小苗的侧根发达，当根长平均在4~5cm时，可将小苗再移入疏松的泥土钵中定植。新移栽的小苗避免阳光直射。小苗成活率可达到85%~90%。

出瓶苗的适时移栽和过渡管理中空气湿度的控制是移栽苗成活的关键。过早移栽，则根太幼嫩，难以适应新环境；过晚移栽，苗及根已老化，生活力明显减弱，两者都易导致移栽苗死亡。培养近20d的生根苗，根长达2~4cm时，移栽最好，此时的苗和新根都较健壮，生活力强，移栽25d后，小苗根长可达6~7cm，而且根系发达。