二、有效的培养方法

1、培养基配

诱导培养基  MS+BA 3~5mg/L+椰子汗10%。

增殖培养基  MS+BA 1~2mg/L+NAA 0.1~0.2mg/L。

生根培养基  1/2MS+NAA 0.3mg/L+IAA 0.2mg/L+活性炭0.3%。

2、培养程序

（1）取材  在生产中选择中等偏大而且生长健壮无病虫的植株，取其茎段或刚萌发不久的小芽，作为最初培养的外植体。

（2）灭菌  取下完整的植株后，用自来水冲洗干净外表的泥，剥去植株外部的3~4层叶片及叶梢，并切掉过长的叶片和基部根系，将去叶后的材料在洗衣粉水中浸泡几分钟，并不断搅拌，然后用清水冲洗干净，在70%的酒精溶液中表面消毒20~30s，再用0.2%的升汞溶液消毒15~20min，用无菌水冲洗4次，最后用无菌滤纸吸干水分，将两头切去进行接种。

（3）生长及分化  外植体接种于诱导培养基中15d后，其茎尖和叶片开始伸长，1个月以后在小苗的基部开始形成芽状小突起，也有少数的芽体直接从基部产生。将其继续转接于诱导培养基中，再过1个月，芽状体分化成丛状小芽，这时可以将丛状芽进行分割并继代于增殖培养基中，每隔1上月转切1次，每次均会从状丛芽的基部再长出新的丛生芽，月增殖率可以达到3~4倍。

（4）生根培养  待扩繁达到一定的产量基数后，可开始边保持一定量的繁殖基数，边将高度达到3cm左右的完n无根小植株切下，接种于生根培养基中，15d后开始长根，20d以后长成具有3~5条1cm以上的根系，苗高3~4cm的完整小植株，这时即可出瓶进行过渡移栽。

三、质量标准及调控技术

出瓶组培苗的标准是苗高3~4cm，植株直立健壮，根系发达、粗度适中。在整个诱导、增殖及生根培养的过程，品种、外植体、激素和环境等多种因素影响其生长发育和组培苗的质量，所以在进行实际操作时，吴丽芳等人通过实际操作后认为：应该选择生理年龄较小的外植体进行培养，一方面容易获得无菌体系，另一方面再生和增殖频率较高。在细胞分裂素的使用上，前期诱导时浓度要高，以后随着继代培养次数的增加，逐渐降低其用量，到开始转入边生根边维持繁殖生产时，BA用量降到1~2mg/L即可。同时激素的使用还应根据各个品种及其长势进行调整，激素作用在一定程度上存在累加效应，如果多次使用BA5mg/L以上的培养基，不仅会抑制新芽的发生而且还会出现玻璃化苗。操作方式上，每次继代时将不定芽叶片上部约1/2切去，可以促进基部新芽的产生。在环境调控方面，采用较高温度，用不透气膜并适当添加GA能促进生长。

四、出瓶苗的过渡管理

达到出瓶标准以后，于出瓶前1d将封口膜揭开炼苗，次日将小苗取出于清水中洗去基部的琼脂，移栽于经过腐熟的腐殖土与珍珠岩按3:1的比例进行混匀的基质中。移栽时要注意浅栽，切忌深种，在移栽初期要注意保湿和遮阴，用小塑料棚和遮阳网进行保湿和遮光，10d以后可以逐渐增加光照并在早晚光线较弱时揭开小棚适当通风和换气，直至可以在自然环境中正常p生长和发育。一般1~2个月后可以移入小花盆中培养。移苗后的生长速度与根系的诱导和生长情况有关，根系多而且粗壮的植株移栽后生长快，而根系少而细的小苗，移栽后的生长速度较慢，成活率也相对要低。