有效的培养方法

1、培养基配方

诱导培养基  MS+BA 4mg/L+NAA 2mg/L。

增殖培养基  MS+BA 2mg/L+NAA 0.1mg/L。

生根培养基  1/2MS+IBA 2mg/L+肌醇 100mg/L+水解酪蛋白 1000mg/L+5%黄瓜汁+0.2%活性炭。

2、培养程序

（1）取材及灭菌  取假鳞茎上新生侧芽，用肥皂粉刷洗表面，并用流水冲洗干净。剥去外层苞片，露出芽体，用70%酒精擦洗3~4s，然后放入0.1%升汞溶液中灭菌20min，再用无菌水冲洗干净（也可用8%漂白粉代替升汞消毒）。将消毒后的茎尖切成2mm×1.5mm×1.5mm方块接种培养。由于大花蕙兰芽不易引起褐变，可直接在培养瓶中进行诱导培养，勿需频繁转瓶。

（2）生长及分化  外植体接种2周后，略见膨大。1个月后，有的外植体上出现颗粒状物质即原球茎，有的外植体长出小芽。将原球茎和小芽丛切割转至增殖培养基上进行继代培养，原球茎快速增0，同时分化长出小芽，形成兰花组培中常见的原球茎与丛芽同时存在的状况。将分化出的丛芽切割成单株，接入生根培养基，13d左右开始长根，水解酪蛋白等有机物质能促进其生长，且生根率达到100%。

质量标准及调控技术

在组培研究中发现p在大花蕙兰瓶苗生长的培养基中附加激素、有机物质，对其生根、壮苗有促进作用，适量的激素再加肌醇和水解酪蛋白能提高瓶苗的生根率，良好的根系又促进了茎叶的生长，从而获得根强苗壮的组培植株，为提高大花蕙兰瓶苗的移栽成活打下了基础。组培植株生长的另一个关键因素是光p强度。大花蕙兰是一种在小苗阶段及开花前均需一定光照的植物，光照强度对组培瓶苗生长影响极大。试验表明，接种后60d，在2500lx光照下培养的组培瓶苗，其生根率高于500lx光照下培养的。即在强光下培养的瓶苗生根率为92.5%~100%，而在弱光下培养的瓶苗生根率仅为55%~65%。从根的生长长度来看，也表现强光下瓶苗长势较强。从整个植株的生长状况也可看出，强光下的瓶苗壮，移栽后成活率高，而在弱光下培养的瓶苗弱且不分化叶片，移栽后成活率低。

大花蕙兰是第一个用茎尖进行试管繁殖再生植株的兰科植物，到目前为止，大花蕙兰的组培快繁仍主要以茎尖为材料。在诱导原球茎、原球茎增殖及丛生芽诱导、小苗生根等这一完整的培养体系中，添加100g/L的香蕉具有很好的培养效果，对原球茎的增殖和植株的生长均有促进作用。

出瓶苗的过渡管理

当试管苗生长至15cm左右，根2~3条时即可移植。将试管苗带瓶移入温室几天，打开瓶o炼苗3d，取出苗用水冲洗掉琼脂，以免发生霉菌腐烂。将菌吸干水分阴凉1h后再定植于树皮或水苔育苗盘中。刚定植的植株最好遮光50%，温度20℃左右，保持一定湿度，且注意通风。大花蕙兰试管苗对基质的要求不太严格，泥炭土与蛭石的混合物、碎陶粒、水苔都可作为基质。一般移栽成活率可达到95%以上。

大花蕙兰具有较强的耐寒能力，喜阳、喜水。因此冬季最低温度可达3~10℃，夏季仅能承受30℃高温，栽培最适温度为10~20℃。尤其要注意的是花前及花期管理。大花蕙兰花芽的形成需要一定的春化作用，即需要一定的低温处理，一般在5~10℃就可经过春化作用。因此，在有暖气的北方地区，在11月份应将植株置于有暖气的温度，温度过高，空气干燥，花蕾易变黄，脱落。