在植物组织培养中，不同植物繁殖的最适温度不同，大多为25±2℃。通常低于15℃时，培养的外植体组织生长出现停滞，但高于35℃对生长也不利。促进芽发生的温度可略低，如烟草芽形成以18℃最好，12℃以下或33℃以上出芽率均低。此外，在考虑某l培养物的温度要求时，也应考虑原植物的生态环境所处温度条件，如生长在高海拔和较低温度环境的松树，在较高温度条件下试管苗生长缓慢。温度预处理也对试管苗增殖有影响。高温处理既可获得无病毒苗，又影响到器官发生。草莓的茎尖分生组织经38℃处理3-5天，提高了无病毒茎尖分生组织的成活率。在一些木本植物，如桃的胚培养中，一定时间的2-5℃低温处理有利于提高胚的成活率。
