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母液的配制和保存
发布时间:2018-08-29

培养基中的许多营养元素含量较少,如果每次配置培养基时都称量各种元素,既繁琐叉很难称量准确。为了节省时间,便于操作,在实际操作时。应先配成高浓度的母液,然后再吸取一定量的母液配制成所需浓度的培养基。工作母液能够简化培养基配制程序,从而节约大量的人力、时间,同时减少每次少量称量配制的误差。配制培养基最方便的方法是预先配制好不同组分的培养基母液,配成培养基配方使用浓度的10倍或100倍,甚至1000倍。这些母液包括无机盐、维生素以及在水溶液中稳定的生长调节物质等。平时应贮存在2-4℃冰箱内,待做培养基时ǔ觯按比例稀释配用。母液的配制有两种方法:一种是配制成单一化合物母液;另一种是配成几种不同化合物的混合母液。前一种方法适合配制多种培养基都需要的同一种母液;后一种方法在大量配制同种培养基时省时省力。
现以MS培养基配制为例,在配制母液时为减少工作量可ò鸭钢忠┢罚ㄈ缗嘌基中的大量元素或微量元素)配在同一母液中(表3-2),但应注意各种化合物的组合以及加入的先后顺序,以免发生沉淀。通常把每种试剂单独溶解后再与别的也已完全溶解的药品混合,或者待前一种化合物完全溶解后再加入后一种化合物。混合已溶解的各种矿质盐时还应注意先后顺序,力求把Ca2+与SO42-和PO43-错开,以免形成硫酸钙或磷酸钙的不溶物。同时,要慢慢的混合,边混合边搅拌。


铁盐宜单独配制,其配法为称取5.57g硫酸亚铁(FeSO4・7H2O)和7.45g乙二胺四乙酸二钠(Na2-EDTA),分别溶于两个大烧杯中,每个溶液大约400毫升,用电炉将Na2-EDTA加热到微沸,然后将FeSO4・7H2O缓慢倒入其中,并不断搅拌,等冷却后定容至1L,将PH值调至5.5,放于冰箱保存,用时每配1L培养基取该溶液5ml。
对于植物生长调7物质,配制成母液时,通常用mg・ml-1(ppm)较方便,一般宜配制成0.5 mg・ml-1的母液,这样的浓度既便于计算也可避免冷藏时形成结晶。由于多数生长调节物质难溶于水,因此配法各不相同:IAA, IBA 和GA3可先用少量95%酒精溶解,再加水定容,摇匀后贮于试剂瓶中、贴上标签后7存放在冰箱中;NAA可溶于热水或少量95%酒精中,再加水定容至一定体积;2,4-D不溶于水,可用1mol・L-1的HCl中,再加水定容;玉米素先溶于少量95%酒精中再加水定容至一定浓度。目前植物生长调节物质浓度的表示法有两种:一种是ppm(或每升mg数);另一种是mol・L-1,其互相7算方法见附录。
椰子汁的活性成分是耐热的,椰乳汁从椰子中倒出后应立即煮沸过滤去除蛋白质,高压消毒后贮于-20℃低温冰箱中备用。
配制好的各种母液应分别贴上标签,写明母液名称、配制倍数、日期及配1L培养基时应吸取的各母液量。母液最好在2-4℃的冰箱中保存。尤其对生长调节物质与有机类物质要求较严。贮存时间不宜过长,如发现有霉菌和沉淀结晶产生,就不能再使用。
严格来讲,用于配制培养基的水最好是用玻璃容器蒸馏过的去矿质离子的蒸馏水。所用的各种化学药品应尽可能采用分析纯或化学纯级别的试剂,以免杂质对培养T斐刹焕影响。生长调节物质在应用前有时还需要进行重结晶或选用纯度更高的。蛋白质水解物最好是用酶水解的,这样可以使氨基酸更好的在自然状态中保存。药品的称量及定容都要准确,不同的化学药品需使用不同的药匙,避免药品的交叉污染与混杂。称量时应特别仔细,每称取一种F范加λ媸奔锹汲屏壳榭觯ò括品名、重量等),以免重复搞错,又便于今后分析。

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