组织培养中光照也是重要的条件之一，主要表现在光强、光质、以及光照时间方面：
1）光照强度(light intensity)
光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响，从目前的研究情况看，光照强度对外植体及细胞的最初分裂有明显的影响。一般来说，光照强度较强，幼苗生长的粗壮，而光照强度较弱幼苗容易徒长。植物组织培养中，主要依靠外来碳源作为能源，光照主要是满足植物形态建成的忠，所以300～500lx的光强已经可以保证，但对于绝大多数的花卉，2000～3000 1x比较合适。在生根阶段，为了使生根苗生长健壮，尽快地适应大田环境，要适当增加光照强度到3000～5000Ix，甚至10000lx。若补充浓度较高的CO2，可以促进增强小苗自身的光合作用，迫使其由异养型转变为自养型，从而使组培苗生长得更健壮。
 为了节约成本，在组培室的建造和设计时，可以考虑充分利用日光，“采光较好的房间有作培养室，光线较差或较阴暗的房间作为试剂室和培养基制作间。也有人用温室来做培养室，同样获得了比较好的培养效果，利用自然光为光源淠芄唤档蜕产成本，同时．由于自然光一般比日光灯强，所以培养的苗比较矮壮，虽然在强光下植株生长比较迟缓，并会轻微退绿，但由于碳水化合物的积累多，组织充实，容易适应外界环境，过渡移栽成活率高。如果只利于自然光照，受到天气的影响较大，一方面是各层间及层内各行列涫芄獠痪匀，另一方面在晴朗无云的天气下，过强的日照会使苗被灼伤，甚至死亡，需用较薄的窗帘进行适当遮光；但在连续的阴雨条件下．则光照不足，苗会细弱和徒长。有必要所有的培养架都安装日光灯，在具体使用时可以根据植物的需要及当时的天气情况灵活调整。
2）光质(light wave)
光质对愈伤组织诱导，培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响。如百合珠芽在红光下培养，8周后，分化出愈伤组织。但在蓝光下培养，几周后才出现愈伤组织，而唐菖蒲子球块接种15d后，在蓝光下培养首先出现芽，形成的幼苗生长旺盛，而白光下幼苗纤细使庵识宰榕嗝绲纳长也有一定的影响。如对香石竹的研究表明，不同波长的光在组培中所起的作用不同，蓝光有利于诱导侧芽产生，还有利于蛋白质含量的增加；红光可以促进芽增长，并且生长整齐。白光有利于组培苗的生长发育，生物产量最高，红光次之；蓝光促进提高茎叶中的还原糖柿浚但对总糖的影响不大；白光还能增大叶绿素的合成。范慈惠等研究发现，唐菖蒲的子球切块，在蓝光下出苗比在白光和红光下早，且幼苗生长旺盛，根系粗壮；白光下幼苗纤细；红光下出苗量少。而红光对百合和四季豆愈伤组织的诱导和生长比在自光下好。如果能把这些光质的作用，室馐兜卦擞玫街置绲墓婺；生产中，可达到节省能源，提高产量的目的。
3）光周期(light period)
试管苗培养时要选用一定的光暗周期来进行组织培养，最常用的周期是16h的光照，8h的黑暗。研究表明，对短日照敏感的品种的器官组织，在短日照下易分化，而在长日照什生愈伤组织，有时需要暗培养，尤其是一些植物的愈伤组织在暗下比在光下更好，如红花、乌桕树的愈伤组织。对于大多数的植物来讲，每天14～1 6h的光照，8～10h的黑暗即可满足生长发育的需要。但不同的植株及不同的培养目的有时也有一定的差异，12h的光周期对于菊花块茎形成苗是适合的；天竺婪愈伤组织诱导芽形成，以15～16h的光照产生的芽最多，如果24h照明，则愈伤组织不能转绿，芽也不能产生；牵牛花茎尖分生组织在16～18h的光照下，均能很好的生长和形成小植抹，并不必全天光照；花叶芋的叶切块在16h的光照和长期的黑暗条件下产生胚状体和小植株缌硗猓光周期对花芽的形成和诱导也有明显的影响，有的植物在愈伤组织诱导阶段需要暗培养，在分化芽阶段则需要光照，如唐菖蒲；在香石竹茎尖培养的最初几天，需要暗培养，然后转人正常培养，有利于愈伤组织的发生；有些对光敏感的品种，在一定的光照条件和时间下会诱导花芽分绲取