植物组织培养接种操作及组培苗的生长和增殖是在严格的无菌条件下进行的，常用的接种工具，如镊子、剪刀、解剖刀、解剖针及培养材料均要经过严格的灭菌处理，否则会因污染而引起组培工作失败。这些工具在使用前必须严格消毒，镊子、剪刀、解剖刀、解剖针可用牛皮纸包好放在高压锅内灭菌，将温度控制在121～126℃，压力在0.11MPa灭菌20～30min．
接种时由于有一个敞口的过程，所以是极易引起污染的时期，这一时期主要由空气中的细菌和工作人员本身髌穑接种室要严格进行空间消毒。接种室内保持定期用1%-3%的高锰酸钾溶液对设备、墙壁、地板等进行擦洗。除了使用前用紫外线和甲醛灭菌外，还可在使用期间用70%的酒精或3%的来苏儿喷雾，使空气中灰尘颗粒沉降下来。无菌操作可按以下步骤进行：
(1)在接种前20min，打开超净工作台的风机以及台上的紫外灯，并打开室内紫外灯进行灭菌；
(2)接种员先洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，并换穿拖鞋等；
(3)上工作台后，用酒精棉球擦拭双手，特别是指甲处，然后擦拭工作台面；
(4)先用酒精棉球擦拭接种工具，再将镊子和剪子头至尾过火一遍，然后反复过火尖端处，对培养皿要过火烤干；
(5)将初步洗涤及切割的材料放人烧杯，带入超净台上，用消毒剂灭菌，再用无菌水冲洗，最后沥去水分，取出放置在灭过菌的4层纱布上或滤纸上。
(6)材料吸干后，一手拿镊子，一手拿剪子或解剖刀，对材料进行适当的切割。如叶片切成0.5cm见方的小块；茎切成含有一个节的小段。微茎尖要剥成只含l―2片幼叶的茎尖大小等。在接种过程中要经常灼烧接种器械，防止交叉污染。
(7)用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。具体操作过程是：先解开包口纸，将试霞负跛平拿着，使试管囗靠近酒精灯火焰，并将管口在火焰上方转动，使管口里外灼烧数秒钟。若用棉塞盖口，可先在管口外面灼烧，去掉棉塞，再烧管口里面。然后用镊子夹取一块切好的外植体送入试管内，轻轻插入培养基。若是叶片直接附在培养基上，以放1-3块为宜。至于材料放置方法除茎尖、茎段要正放(尖端向上)外，其他尚无统一要求。放置材料数量现在倾向少放，通过统计认为：对外植体每次接种以一支试管放一枚组块为宜，这样可以节约培养基和人力，一旦培养物污染可以抛弃，接完种后，将管口在火焰上再灼烧数秒钟，并用棉塞，塞好后，包上包口纸，包街嚼锩嬉惨过火。
(8)接种时，接种员双手不能离开工作台，不能说话、走动和咳嗽等；
(9)接种完毕后要清理干净工作台，可用紫外灯灭菌30min。若连续接种，每5天要大强度灭菌一次。
无菌操作在接种室内进行，接种前，接种室要用紫外灯消毒，紫外灯照射要15min以上。接种工作在超净工作台内进行，接种前超净工作台应预先开机15min以上，操作人员要在缓冲室内换好经过消毒的工作服，戴上口罩，接种前先用香皂将双手洗干净，再用75％酒精棉球认真擦洗，尤其是手指、指缝和指甲。超净工作台台面也要用酒精棉球认真擦洗。从培养室内嚼吹钠棵缫用75％酒精擦拭(配制方法见附录)，进行表面消毒后再放人工作台内。经过高温高压灭菌的接种工具，在接种过程中每用一次，均要在95％的酒精中，洗去用具上附着的琼脂和叶片后，再在酒精灯火焰上灼烧消毒后再用。在大规模的生产中，可以用专用的接种消毒器等电热器械蕉荆这些消毒器不仅能快速达到300℃以上的高温，获得较好灭菌效果，而且还可以避免使用酒精不慎，而引起的火灾。接种时培养瓶口要处在酒精灯火焰附近的无菌区，手不要碰到已灭过菌的器具下部。在切割材料和将材料接人瓶子时，手尽可能的不要在无菌接种纸上方移动。左手将培养瓶呈45度角拿着，右手用镊子将生根和繁殖苗轻轻放人培养基中，若在接种时镊子与瓶口垂直，手上微生物容易落人瓶中引起污染。在接种操作过程中，切割、转接、人瓶、盖膜等各个环节均要求规范、准确、迅速，才能达到无菌无污染。此外，超净工作台还要定期清洗和更换粗过渡网，常用风速仪测定，使风速保持在 24～30m／min。整个接种室的各种物品摆放要整洁、有序，人员尽可能少在其中走动，如果使用水平式欧风的工作台，接种人员还要戴口罩，并尽量不要在接种时闭谈，以免产生对流的气流而影响操作效果。