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培养用具的洗涤
发布时间:2018-06-01
植物组织培养各项操作都应从对人体无毒害、对环境无污染的角度来考虑。在大规模的生产中洗涤培养瓶及其他常用器皿是组培过程中最经常、最大量的工作之一。洗涤间可以在一个单独的较小房间内进行,但最好是离灭菌间比较近,有条件的地方可以选用一个较大的房间,将培养用具的⑾春兔鹁安排在同一个房间内,以便于流水线作业和机械化操作。清洗间应有较大的水池,水池一般用水泥制作,白瓷砖砌内外表面,这样更容易清洗并保持干净,也可以在较大的塑料盆内进行;墙面最好贴上瓷砖或涂上防菌油漆,以防因过于潮湿而生霉;自来水龙头最好用三孔鹅颈式的逋罚以方便用水;下水道应加装过滤器,以防异物进入引起阻塞,而影响正常的工作。除水池以外,还需辅助以若干塑料盆与桶。在洗涤培养用具时,要用洗涤剂才洗得干净。最常用的洗涤剂就是平时用的洗衣粉(肥皂粉)。把洗衣粉倒人盆里加水就可直接清洗培养用具,但在冬天比较冷的褰冢应用热水溶解洗衣粉后再洗,这样可以提高洗衣粉的效力。洗衣粉较便宜,洗洁精虽方便于清洗,但价格高。洗涤间内应该有一个较长的操作平台,用于堆放洗净的瓶子和其他用具。
清洗玻璃器皿的洗涤剂有肥皂、洗洁精、洗衣粉和铬酸洗涤液。铬酸洗涤液有三种配方:(1)稀铬酸洗涤液DD重铬酸钾50g溶于1000ml蒸馏水中,冷却后缓慢加入工业用硫酸90ml。(2)强铬酸洗涤液DD重铬酸钾10g溶于20ml蒸馏水中,冷却后再缓慢加入浓硫酸(比重1.84)175ml。(3)饱和铬酸洗涤液DD重铬酸钾10g和蒸馏水20ml,加热溶解,冷却后慢慢加入浓硫酸,并同时┞的加入研碎的重铬酸钾直到饱和为止,一般比例为1000ml加入重铬酸钾50g即可。由于铬酸洗涤液具有极强的氧化能力和腐蚀作用,故不要用手接触洗涤液;在配制时重铬酸钾一定要冷却后才能加浓硫酸,且只能把浓硫酸缓慢加入重铬酸钾溶液中,决不能把重铬酸钾液或蒸馏水倒入浓硫酸中。所配铬酸洗涤液为暗红色液体。
清洗玻璃器皿时,如果是新购置的玻璃器皿,由于它们会或多或少含有游离碱性物质,使用前先用1%稀盐酸浸泡一夜,然后用肥皂水洗净,清水冲洗,最后用蒸馏水冲淋一遍,干后备用。
使用过的瓶子应先在水龙头下将培养基冲干净,然后在清水中浸泡lh,一些瓶内仍有污物的要用瓶刷刷去,再泡人洗衣粉水中,洗瓶时崩瓶刷沿瓶壁上下刷动并呈圆周旋转和刷洗,瓶外四周及瓶底也要刷到,瓶口是最不容易洗净且易污染的部位,在洗瓶时要特别注意。之后放到水龙头下,用自来水冲刷瓶的各部,或放人清水中漂洗,以底冲去洗衣粉残留物。用记号笔作过标记的培养瓶,还需把字迹擦洗干净,以防以后使用时引起品种的混杂。洗好的瓶子应透明锃亮,内外壁水膜均一,不挂水珠。在大规模的产业化生产中,洗好的瓶子一般无需再用蒸馏水或去离子水冲洗,可直接放人洁净的塑料大果箱中,再层层堆起晾水汽。最好的办法就是把洗好的瓶子,倒放在果篮中自然晾干水汽,到第二天用瓶时无需再收一次瓶子,把果蓝直接推人培养基灭菌室,摆放在培养基分装台上即可。培养瓶的清洗也可用洗瓶机进行,以提高效率和降低劳动强度。如果规模较小或以试验性研究为主也可用晾洗架,把洗好的子倒放在孔格中或挂在小木棍上,这样洗后要摆一遍瓶子,用时再收一次瓶子,此法操作起来比较费时费空间。急等使用的瓶子可以用烘箱烘干,烘时缓慢升温,温度无需太高。但在大规模生产中应备有大量培养瓶,每次清洗后把培养瓶倒过来沥干水即可使用。
对已被霉菌等杂菌染的玻璃器皿则必须先在121℃高压蒸气灭菌30min后,趁热倒去残渣,用清水冲洗。必要时还要用蘸有洗涤剂的毛刷刷去瓶壁上的培养液和霉菌斑,再用水冲洗干净后,浸泡在浓的重铬酸钾洗涤液中,2h后取出,用自来水冲洗多次,再用蒸馏水冲淋一次,晾干备用。切忌直接用水清洗,否会造成培养环境的污染
移液管之类的量具和仪器,可以在溶化的洗衣粉水中吸洗,再放在水龙头下冲洗,洗净后倒放垂直晾干,带刻度的计量仪器不宜烘烤,以免玻璃变形,影响计量的准确度。如洗后急等使用,可用洗耳球把移液管壁上的水吹去,再用要吸量的液体吸弃数次-或用95%酒精吸弃数次即可使用。
用过的载玻片和盖玻片,由于盖玻片薄而脆,极易破碎,应与载玻片分别洗涤。通常经水洗晾干后放入洗涤液内浸泡数小时,取出后用水冲洗几次后,再用清洁而柔软的绸布擦干。对沾有油脂或香脂的载玻片或盖玻片可先用肥皂水或洗洁精液煮过再洗孟淳坏脑夭F和盖玻片可贮放在95%的酒精(滴加少量浓盐酸)中,使用时用布擦干。
总之,洗净的玻璃器皿应透明发亮、内外壁水膜均匀,不挂水珠。

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