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脱毒效果的检测方法
发布时间:2015-04-20
    
   经过脱毒处理的植株是否还存在病毒,必须经过病毒学检测才能确定。可靠的病毒 检测方法与建立有效的脱毒方法同等重要。传统上一直沿用的检测方法是目测法,但是这种方法无法剔除潜隐性病毒。后来出现的指示植物法,扩大了检测范围。近年来随着生物科学的迅猛发展,免疫学方法,分子生物学方法等许多先进的理化技术的应用,促进了病毒检测技术的改进与发展。下面简要介绍几种检测脱毒苗的方法。
   1 植株直接测定法  
   直接观察植株茎叶有无某种病毒引起的可见症状,是最简单的测定方法。不过,由于某些寄主植物感染病毒后需要较长的时间才出现症状,有的并不能使寄主植物出现可见的症状,因而无法快速检验。
   2 指示植物法  此法最早是美国的病毒学家Holmes l929年发现的。利用病毒在其他植 物上出现症状的特,作为鉴别种类的标准。当原始寄主的症状不明显时,就可用指示植物法,这是因为指示植物比原始寄主更容易表现症状。具体做法是将病叶研磨,把汁液接种到寄主植物上,对于木本植物,是将原始寄主嫁接到指示植物上。指示植物法简便易行,成本低,但它灵敏性差,所需时间长,难⑶分病毒种类。 
   3血清学方法     
   抗血清鉴定法要进行抗原的制备(包括病毒的繁殖,病叶研磨和粗汁液澄清 等),抗血清的采收、分离等。血清可分装到小玻璃瓶中,贮存在C15~C25℃的冰冻条件下。测定时,把稀释的抗血清与未知的病毒植物在小试管内混合,这一反应导致形成可见的沉淀,然后根据沉淀反应来鉴定病毒。此法灵敏度高,获得检测结果迅速,是目前检测病毒的一种最好方法。  此外,PCR微量板杂交法、蛋白质电泳法、嫁接检测法、 电子显微镜检定法、 病毒症状学诊断法等也鸵杂美醇觳庵参锊《尽

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