长期以来,体细胞的全能性一直被用于植物的营养繁殖。在自然界,若干种植物的茎、叶和根段能分化出芽和根,形成新的植物体。离体条件下的研究表明,这种潜力并不只局限于某些园艺物种。只要能得到适当的条件,多数植物都能由体细胞组织以及生殖组织分化出茎芽和根来,而不论这些组织的倍性如何。
培养体中发育的分生组织,最初出现高度细胞质的、局部染色深的细胞,形成芽时,在外植体或愈伤组织边缘,形成根时,常在愈伤组织内部。
通常器官原基的发生起始于一个细胞或一小团分化的细胞,经分裂后由它们产生类分生组织。在形态上这团类分生组织细胞具有稠密的原生质和显著增大的核。类分生组织的进一步活动使构成的器官在纵轴上出现单向极性及表现出器官的分化。不过,在组织培养中出现的细胞s(或类分生组织)也并不是总与器官形成有关,在很多情况下,它们也可继续形成为愈伤组织。在组织培养中通过形成芽或根而再生植株的方式大致有三种:一是先产生芽,芽伸长后在其茎的基部直接长根而形成完整的小植株;二是先长根,再长芽;三是在愈伤组织的不同部位分别形成根s芽,或许二者亦可结合起来形成完整小植株。在第一种情况中,尤其是在木本植物的组织培养里较为普遍。它们常常是诱导芽与诱导生根要分两步进行。在把伸长的苗从基部切下后再转入含萘乙酸(NAA)或吲哚丁酸(IBA)的生长素培养基上生根。与根的发生情况类似,芽或苗也可以由植s体的不同部分诱导形成,它们可以经过愈伤组织,也可以不经过愈伤组织而直接从胚状体、茎尖或原球茎产生。所以,作为通过组织培养而获得无性繁殖系来说,可以概括为下列几种方式。
将待繁殖的材料剪成带叶和节间的茎段,转入培养基,一定时间后可成苗,再剪成带叶和节间茎段,继代又可成苗。例如:葡萄、马铃薯、满天星的 殖就是采用这种方法。该方法能迅速获得一个或一丛苗,遗传性状稳定,培养过程简单,适用范围广,移栽容易成活。这是花卉试管苗繁殖最常用的,也是其他方法最后阶段的常用方法,但繁殖初期速度较慢。
茎尖培养的芽,在细胞分裂素和生长素的比例较高的培养基上诱导,这时,会不断形成丛生芽,然后切取较大的芽转入生根培>基中,诱导生根成苗,小的丛生芽切割后继续扩大繁殖。例如,海星、勿忘我,地被菊、草莓、矮牵牛等就是采用这种方法。这种方法从芽到芽,遗传性状稳定,繁殖速度快,是花卉组织培养中常用的方法。
让植物叶片、子房、花药、胚珠、叶柄等成熟组织经过恢复分生能力,诱导出愈伤组织,再从愈伤组织诱导不定芽。这些 定芽通过上述两种类型扩大繁殖,再生植株。如香花槐、非洲菊的培养。这种分化类型可能会发生变异,用于良种繁殖时应注意。
从植物叶片、子房、花药、未成熟胚等诱导体细胞胚胎发生,经原胚期、球形胚期、心形胚期、鱼雷形胚期及子叶期而发育成植株。其发生和成苗过程类似合子胚或种子。这种胚状体具有数量多、结构哒、易成苗和繁殖速度快的特点,是植物离体无性繁殖最快的方法,也是人工种子和细胞工程的前提,受到国内外的普遍重视。但能诱导胚状体的植物种类及品种还不多,其发生机理尚不清楚,有的还存在一定变异,应先要试验后才能在生产上大量应用。
原球茎是一种类胚组织,由细胞或组织培养经原球茎途径再分化成小植株。培养s合、兰花类的茎尖或腋芽可直接产生原球茎,继而分化成植株,也可以继代增殖产生新的原球茎,这取决于培养条件和培养基。
直接从离体茎、叶、花芽、鳞片等母体组织产生小植株。特别是一些具变态茎叶的器官(如鳞片、球茎、块茎等)的植物,在离体培养下很容易形成相应的变态器官而再生小植株,如百合、水仙等。