一、月季（Rosa chinesis）

（一）国内外研究概况

月季是近代风风靡世界的名花，素有“花中皇后”之美誉，位于四大切花之首。其产量约占四大切花的50%，是国际市场上非常流行的切花种类。传统的方法是用嫁接和扦插法进行繁殖，但繁殖速度较慢。自20世纪60年代组培技术在生产中应用以来，许多研究者在月季的组培方面做了大量的研究工作，在月季ㄅ嗝绲睦用方面也取得了很大的进展，对加速新品种的推广和运用起致函积极的作用。我国的研究者从20世纪80年代以后便开始进行切花月季组培种苗的生产，在组培的各个领域取得了很大的成绩。目前已从不同成分的培养基，如B5、N6、MS等多种培养基上获得成功，但其中以MS培养基的效果最好。同时就细胞分裂素、生长素、赤霉素、取材部位、摘心、切割长度、继代时间、无机盐浓度等对嫩茎增殖的影响进行了全面的研究。在生根培养方面，从生长素的种类和浓度、细胞分裂素、MS培养基中无机盐的含量以及培养基硬度、糖浓度、活性炭的应用等各个方面进行了研究。培养环境方面对光照强度、光周期、温度对增殖和生根的影响进行了较为全面的研觥Ａ硗舛砸禾迮嘌和固体培养进行了比较，认为使用液体培养可以提高增殖率，有利于培养壮苗。

（二）有效的培养方法

1、培养基配方

诱导萌芽培养基  MS+BA 0.5~1.0mg/L。

增殖培养基  MS+BA 1~2mg/L+NAA 0.2mg/L

生根培养基  1/2 MS+NAA 0.1~0.2mg/L+IAA 1.0mg/L或NAA 0.5mg/L。

2、培养程序

（1）取材  取芽时要在无病虫害的优良品种单株上进行。选取生长健壮的当年生枝条，取其饱满p未萌芽作为外植体。因枝条顶部和基部的侧芽萌发能力较差，取中部的芽效果最好。也可以选用顶芽作为外植体，但培养效果不如侧芽。在春天选取刚萌芽但未展叶的嫩梢作外植体，也能获得很好的培养效果。用已经木质化或半木质化的枝条作为外植体很难获得成功。

（2）灭菌  将取回的材料用手术刀片切去叶片及叶柄，切成1~2cm的带节茎段（如果是嫩梢需切去少许芽顶部）。将清理好的材料在自来p下冲洗干净，然后在无菌条件下加入0.1%~0.2%的升汞溶液灭菌15~10min，再转入1%~1.5%的次氯酸钠溶液中浸泡10min，取出在无菌水中清洗2~4次。在整个灭菌和清洗的过程中，应不停地摇动瓶子，使其充分与消毒液接触，否则会影响消毒和灭菌的效果。灭菌后的外植体取出后用无菌滤纸吸干水分待用。

（3）生长及分化  在诱导培养基中，7d后芽开始萌发，茎尖展中生长，20d后长至1~2cm；诱导萌芽在只加细胞分裂素的MS培养基上多数品种都是适用的，<是萌芽时间有所不同。生长素NAA并不是必须的，有文献介绍加入少量NAA对诱导并无多少影响。随BA浓度的增加，萌芽时间会延长，对多种培养基进行比较后认为MS培养基<果最好。

（4）继代培养  萌生芽会不断长大，并可从茎段上分化出3~4个不定芽，这时可通过侧芽增殖和不定芽再生的方式进行继代增殖，切割出不定芽或将幼芽分切成每段含1~2个节的茎段，转入增殖培养基中，每隔4周继代一次。增殖率根据品种的不同有很大的差异，低的有2~3倍，高的如“十全十美”等品种可达10多倍。待芽长到一定高度时，可以根据生产计划保留一定的健壮苗作为繁殖基数，其余的可用于生根培养。对于增殖率过高的品种，小菌会变得非常细弱，一般需要转入MS+BA 0.3mg/L+NAA 0.1mg/L（或IBA 0.3mg/L）的低分裂素培养基中进行壮苗培养，再转入生根培养基中。

（5）生根培养  将继代增殖的丛生苗切成长度为2~3cm的单株，转入生根培养基中，12d后便可生根。当根长0.5cm，有2~4条白色的根系时即可出瓶移栽。在生根培养基中加入300mg/L活性炭能提高生根质量。有人研究指出，在生根培养基中只长出根原基，而还无可见根系的小苗，可以进行长途运输，且移栽后成活率高。只产生根原基的无根小苗的培养基是MS+NAA 0.5mg/L。在此培养基上，培养7~10d当根原基形成后即可出瓶。

无论进行诱导、增殖、生根培养，增养室的温度都以21℃左右时效果较好。诱导萌芽的光照为800~1200lx，当照时间为10~12h/d。增殖a壮苗生根的光照强度较诱导培养时稍强需2000~3000lx。