1.材料与消毒
露地生长的材料，在6~8月份匍匐茎生长充实、尖端生长良好时取材。温室生长的材料一年四季均可取材。
取匍匐茎尖或匍匐茎苗，剥去外层叶后用自来水冲洗4小时。可用70%的酒精漂洗后，根据材料的老嫩，再用0.1%的升汞液或6%~8%的次氯酸钠浸泡2~10分钟消毒；或用70%的酒精漂洗后，用0.1%的新洁尔灭浸泡15~20分钟，再用1%的过氧乙酸浸泡2~5分钟消毒。
消毒后，在超净工作台上用无菌水冲洗3次，剥去幼叶和鳞片，取出生长点或带1个叶原基的生长点，作为外植体。若茎尖分生组织小于0.3毫米，经组织培养可以获得无毒种苗。对于结合热处理获取无毒苗的材料，可以取带有2~4个叶原基的生长点，长约0.5毫米。
2.培养基与培养条件
草莓分化培养基和繁殖培养基均为MS+0.5~1.0毫克/升BA，pH5.8。培养温度(26士2)℃，每天光照10小时，光照强度1500~2000勒克斯。接种后20~30天即可长出芽丛，待长满一瓶后，将其分离转入新的培养基进行继代培养。
生根培养基可用MS或1/2MS+0.1毫克/升IBA或0.05毫克/升NAA或0.1毫克/升GA或不加激素。
3.驯化与移栽
取出生根的幼苗，洗净其上的培养基，移栽于温室中驯化。基质用疏松、通气性好的沙土掺入适量腐熟的有机质，移栽后立即浇水。温度控制在15~25℃，空气相对湿度保持在80%~100%。从第三周开始，每天揭开薄膜放一次风，以后逐1延长放风时间和增加放风量直到去除薄膜。驯化过程一般需要2~3个月，期间每天或隔天喷一次水，以不干为宜。植株长出5~6片新叶后，可移至大田或保护地用于栽培。