2结果与分析
2.1刻逖康挠盏冀峁
钻石玫瑰离体芽的诱导较慢,接种4周后离体芽才开始萌动,但芽萌动后的生长情况因培养基内激素浓度的不同而不同。由表1可知,MS+6-BA0.30mg+NAA0.10mg/L培养基丛生芽少,由于6-BA浓度太低,芽分化相对较差,分化率为70%,但丛生芽在培养基中生长健壮;在MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L培养基上,丛生芽相对较少,芽分化率为105%,且丛生芽生长细弱,说明该培养基中6-BA和NAA浓度配比不当;在MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/L培养由于6-BA浓度过高,离体芽萌动后仅产生愈伤组织,未分化出丛生芽;MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L和MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L两种培养基上,20个离体芽分化出的丛生芽分别为49个和39个,分化率分别达245%和195%,且丛生芽生长健壮。重复试验,筛选出适宜离体芽诱导的培养基为MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10~0.20mg/L。
2.2丛生芽的继代增殖结果
从表2可以看出,钻石玫瑰在所采用的4种继代增殖培养基上培养3周后,芽的增殖倍数和大于2cm芽的比率存在差异。其中:MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L和MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L两种培养基上,增殖的丛生芽多,且芽生长健壮,芽的增殖倍数分别为5.67倍和5.2倍,大于2cm的芽占75.29%和71.79%,明显高于其它培养基;在MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L培养基上,芽生长细弱,丛生芽少,增殖倍数仅为2.1倍,大于2cm的芽占18.75%;MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.20mg/L培养基嘤6-BA浓度过高,继代芽产生愈伤组织后停止生长分化。重复试验,筛选出适宜钻石玫瑰继代增殖的培养基为MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10~0.20mg/L。
2.3试管苗生根培养结果
从表3看出,钻石玫瑰在所用的6种培养基上培养15天后统计结果,试管苗的生根率为13.3%~90%,生根数为4~243根,平均根长为0.26~1.5cm。在1/2MS+NAA0.20mg/L、1/2MS+NAA0.50mg/L、1/2MS+IB0.20mg/L、1/2MS+IBA0.50mg/L培养基上,试管苗10d开始生根,生根率分别为60%、23.3%、13.3%和30%,根数分别为90根、14根、4根和27根,平均根长分别为0.35cm、0.26cm、0.6cm和0.45cm,且由生长素浓度过高,15d后根均变成深褐色,停止生长后慢慢死亡。在1/2MS+IBA0.10mg/L和1/2MS+NAA0.10mg/L培养基上,培养9d开始生根,根系发达,发育良好,生根率达63.3%和90%,平均根数8根和9根,平均根长1.1cm和1.5cm,均明显高于上述4种培养基,且小苗和根长势均良好。重复试验,在设计的6种培养基中,1/2MS+NAA0.10mg/L培养基上生根最好。
2.4生根试管苗的驯化移栽
将生根试管苗放在室外光线明亮的地方,闭瓶炼苗2~3d,再逐渐开瓶炼苗2~3d,让植株经受试管外环境的锻炼后取出试管苗洗净基部粘附的培养基,移植于珍珠岩:腐殖土:炉杂为1:3:3的:质中,浇浓度为0.8g/kg多菌灵溶液,遮荫保湿,空气湿度保持在60%~70%,当植株萌发新根后让其逐渐见光,并降低湿度,直至暴露在外界条件下,移栽成活率可达75%~80%。
3小结与讨论
3.1细胞分裂素6-BA和生长素NAA作为外源激素加入培养基后,对钻石玫瑰离体芽的诱导及分V影响十分显著。适宜钻石玫瑰离体芽诱导的培养基为:MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10~0.20mg/L;最佳继代增殖培养基为MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10~0.20mg/L。
3.2钻石玫瑰在试管内生根需较低浓度的生长素NAA和IBA,当NAA或IBA大于2.0mg/L时,钻石玫瑰虽能产生根,但根随即变褐停止生长后死亡。试验结果表明,诱导钻石玫瑰试管苗生根的最佳培养基为1/2MS+NAA0.10mg/L,生根率可达90%。
3.3用组织培养方法可以提高钻石玫瑰的繁殖速度,且植株根系发达,苗木生长健壮、整齐,是批量繁殖钻石玫瑰商品苗的一种好方法。