为认真贯彻福建省强制性地方标准草莓脱毒苗质量标准，指导我省草莓脱毒苗生产，提高草莓苗的质量，特制定本标准。

　　本标准于2001年6月26日首次发布。

　　本标准由福建省质量技术监督局提出。

a　本标准由福建省农科院生物技术中心负责起草。

　　本标准主要起草人：宋亚娜、周莉娟、姜秀勇、郑伟文。

　　1范围

　　本标准规定了草莓脱毒苗生产过程中的定义、培育技术和病毒检测等技术要求。

　　本标准适用于通过组织培养技术培育的不带草莓斑驳病毒(S.oV)、草莓轻型黄边病毒(SMYEV)、革莓镶脉病毒(SVBV)和草莓皱缩病毒(SCrV)的草莓脱毒苗的生产。

　　2引用标准

　　下列标准所包含的条文，通过在本标准中的引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修模使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

　　DB35/T130.2-2001《草莓脱毒苗质量标准》

　　3定义

　　本标准采用下列定义。

　　草莓脱毒苗

　　经过组织培养脱毒处理或直接引进，经检测后确认不带指定病毒的种苗

　　4脱毒苗培育技术

　　4.1脱毒组培瓶苗的培育技术

　　4.1.1优良品种选择

　　选择适宜当地栽培的高产优质品种进行脱毒。

　　4.1.2草莓脱毒的主要方法

　　4.1.2.1茎尖组织培养法

　　4.1.2.1.1外植体选择

　　选择无病虫、品种纯正的健壮植株，切取带生长点的茎段3cm～4cm，用流水冲洗干净。

　　4.1.2.1.2茎尖剥离

　　将表面清洗过的材料置于超净工作台上，用70%酒精表面消毒30s，再用0.1%升汞消毒5min～10min，并不断搅动：然后用无菌水冲洗3次～5次，去鳞片，在解剖镜下用针挑取0.2mm～0.3mm的茎尖，立即接种于茎尖分化培养基中。

　　4.1.2.1.3培养条件

　　草莓茎尖培养所需要温度为23℃～28℃，光照强度为1000Lx～3000Lx，每天光照12h～16h。诱导培养2～3个月，待丛生芽形成后转入增殖培养基。

　4.1.2.1.4组织培养快繁

　　将在茎尖分化培养基础上诱导分化的第一代丛生芽进行病毒检测，合格的试管苗在增殖培养基上增殖，增殖培养每20d～30d继代一次(总继代次数不超过10代)，选2cm～3cm的小苗转入生根培养基，经过20d～30d生根培养，形成完整植株的组培苗出售给ゲ单位或个人；不合格的试管苗全部销毁。

　　4.1.2.2花药组织培养法

　　4.1.2.2.1外植体选择

　　摘取花萼未张开花粉母细胞处于单核期的花蕾，放入4℃冰箱中预处理1d～2d。

　　4.1.2.2.2培养过程

　　取预处理过的花蕾，在无菌条件下用70%酒精浸泡20s，再用0.1%升汞消毒5min～8min，并不断搅动，无菌水冲洗3次～5次，然后在无菌条件下中去除花萼、花托等，用镊子挟取黄色花药立即接种于愈伤组织诱导培养基中。

　　4.1.2.2.3培养条件

　　愈伤组织培养进行暗培养，培养温度为23℃～28℃。

　　4.1.2.2.4组织培养快繁

　　愈伤组织诱导培养2～3个月后，将0.2c，m大小的愈伤组织转入分化培养基中诱导丛芽分化，待分化成茁后，进行病毒检测，对合格的试管苗进行增殖，增殖培养每20d130d继代一次(总继代次数不超过lO代)，选2cm～3cm的小苗转入生根培养基，经过20d～30d生根培养，形成完整植株的组培苗出售给生产单位或个人；不合格的试管苗全部销毁。

　　4.2隔离快繁培育技术

　　隔离快繁培育技术包括脱毒原原种苗繁殖、脱毒原种苗繁殖和脱毒生产用苗繁殖。

　　4.2.1脱毒原原种苗繁殖

　　经过病毒检测的脱毒组培苗移栽成活的植株为脱毒原原种苗。脱毒原原种苗每年应进行一次病毒检测，发现问题即汰除。检测机构要将病毒检测结果报告有关部门。

　　4.2.2脱毒原种苗繁殖

　　由脱毒原原种苗定植于无土壤线虫、无革莓病源和防虫隔离区内，分P繁殖的第一代植株为脱毒原种苗。脱毒原种苗接受病毒检测机构的定期病毒检测，一旦发现问题立即更换。

　　4.2.3脱毒生产用苗繁殖

　　由脱毒原种苗定植于无土壤线虫、无草莓病源和防虫隔离区内，分株繁殖后代为脱毒生产用苗。脱毒生产用苗接受病毒检测机构的定期病毒检测，一旦发现问题立即更换。脱毒生产用苗直接提供给生产单位或个人。

　　5病毒检测

　　5.1病毒种类

　　在我省危害草莓的病毒种类主要有四种，分别为草莓斑驳病毒(SMoV)、草莓轻型黄边病毒(SMYEV)、草莓镶脉病毒(SVBV)和草莓皱缩病毒(SCrV)。

　　5.2检测方法

　　草莓脱毒苗的检测按DB35/T130.2.2001《草莓脱毒苗质量标准》第5章执行。