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关于菊花的组培技术与研究

时间:2020-4-17 浏览数:1312

(一)国内外研究概况

菊花是菊科菊花属多年生宿根草本植物,原产于我国。它花色繁多,品种丰富,具有很强的观赏价值,是目前世界上栽培最广的切花及盆花之一。它的繁殖可以用播种法、扦插法、分株法、组织培养法。在种苗生产上运用最为广泛的方法是扦插和组培。由于菊花的病毒病种类比较多,而且危害也较为严重。使用扦插繁殖苗,容易引起病毒病的扩张和蔓延,因此茎尖脱毒培养和组培快繁生产母本植株,再生产扦插苗的技术,对优良品种的脱病毒和复壮有着重要意义。组培技术在新育成品种的快速繁殖上,应用得更为广泛。在种质资源的保存和利用方面,用试管方法保存大量的育种材料和品种,为以后的育种工作提供各种材料,比在大田保种更容易和有利于节省土地和人力。国内外对菊花的组织培养研究自1972年以来,有过少报道,目前快速繁殖的技术已经很成熟。但在脱毒、菊花花瓣育种和无糖培养方面的研究还在不断深入。

(二)有效的培养方法

1、培养基配方

诱导培养基  MS+BA 0.3mg/L+NAA0.1mg/L

增殖培养基  MS+BA 0.1mg/L+NAA0.1mg/L

生根培养基  1/2 MS+NAA0.1mg/L

2、培养程序

1)选材  菊花能够产生再生植株的器官很多,以组培快繁为目标最好选茎尖、茎段、花蕾为外植体培养增殖效果最好。选取用扦插苗培育的无病虫害、健壮的植株,在其上取材,可保持其优良品种特性。在取材前2~3周,将入选株置于温室内培养,不要对叶面喷水,这样能够提高灭菌的成功率。接种前切取带腋芽的茎段或未开的花蕾,这时花瓣外有一层薄膜包着,里面是无菌的。灭菌处理时茎尖的嫩叶不要剥得太干净,以免伤口面暴露太大,使茎尖受到过大的损害。

2)灭菌  茎段除去叶片,只留一小段叶柄。材料初步切割后,用洗衣粉水漂洗三次,用自来水冲净后,将其放入含有三滴吐温的0.1%升汞溶液中消毒12min。并不时摇动,然后用镊子将其放入含三滴吐温808%次氯酸钠溶液中浸泡8min(超净工作台)并不时摇动,于无菌水中漂洗二次后待用。

3)切割  将茎切去一小段,这样可减少灭菌药物的毒害。切除茎尖上的幼叶;若是花蕾须剥去花被,露出里面半球形的花序轴,再视其大小纵切成4~6块,接种到诱导培养基中。

4)生长及分化  外植体经培养后,一般20~40d茎尖处可分生出新芽,茎断的叶腑处也会萌发出丛生芽,基部生长的愈伤组织也会分化出新芽。而花蕾外植体经过15~20d的培养,会形成愈伤组织;再经过20~30d的培养,愈伤组织就会分化出较多的丛生芽。将从以上外植体诱导分化出丛生芽,分切成数块放入增殖培养基中继代培养。开始分化率和分化苗的数量都较小,随继代次数增加,分生苗很快就能够增多起来。增殖的方式除诱导丛生芽增殖外,还可用茎切段作微型扦插来繁殖,它的增殖速度也完全能满足快速繁殖的要求。方法是用各种再生途径产生的嫩茎为材料,培养其长到一定高度时,把它切成节段,一般是一叶为一段,然后将切断的基部插入增殖培养基中培养。28d后,腋芽即可长成新的小植株,重复上述的方法不断进行继代培养,从而达到快繁的目的。

5)生根培养  在继代培养基中培养25~30d进行转瓶时,将那些生长正常,苗高达到2~3cm的单株嫩茎切下,插到生根培养基中,7d后可形成有突起的淡绿色根原基,经过2周培养后,即可生根。菊花的生根非常容易,在多种生长素浓度下,乃至不加任何生长素的培养基上,都可以获得100%的生根效果。

(三)质量标准及调控技术

菊花出瓶苗的标准是叶色浓绿,粗壮,苗高2~3cm,有根且根系发达。经过渡培养的下地苗,则要求小苗叶色正常,浓绿,植株矮壮。

菊花是一种比较容易进行组织培养的植物,适用于菊花的培养基种类很多,它对激素的要求不很严格,适应范围较广,菊花在组织培养中是一种较不容易因为激素浓度的高低而引起变异或玻璃化的一个种类。但是BA含量不应超过10mg/LNAA不应超过2mg/L。菊花继代苗的植株应达到叶形、株形正常,增殖培养率可达到5~10倍以上。

菊花在培养瓶中培养的温度适应范围较宽,在22~28℃都可以。但温度过低,会使苗质脆弱,生长速度延缓;温度过高培养基水分蒸发较快,致使植株还未分化到所需程度,就开始出现干萎。所以温度最好在24~26℃之间。培养室光照每天12h,光强在1000~4000lx都可以生长,但是光照过弱会使幼苗出现徒长现象,茎软叶细弱,低质量的组培苗,出瓶后的过渡成活率也低。因此光照以2500~3000lx为宜。用来生根的单株嫩茎必须有1~2cm高,在生根培养基上生长15d后,苗高才能达到2~3cm,有2~3条根长达1~2cm的不定根。最好生根率达100%后,才可出瓶炼苗。如若还有少部分植株未长出足够的根系时,可将瓶苗在上述环境培养条件下延缓几日,待其长出根系时再出瓶。

(四)出瓶苗的过渡管理

菊花的有根苗移栽成活容易,将有根的植株从瓶中用镊子轻轻夹出,洗净根部黏附的琼脂,栽入珍珠岩基质中。移栽前期将空气温度保持在75%~85%之间,遮光率为40%,环境温度控制在20~26℃,就可使试管苗在20d左右移栽成活,并长出新根新叶。经1~2个月的管理,便可定植于富含腐殖质、经过灭菌处理的砂质壤土中。菊花喜观微潮偏干的土壤环境,在定植时不必施用基肥,随着小苗对外环境的适应,可每隔1~2周追稀液体肥料一次。由于菊花有忌高温、喜凉爽的习性,菊花试管苗定植后,不可接受过强的日光照射,应该采用选遮荫再逐渐增加光照的管理方法。由于菊花的过渡成活率比较高,所以有时也可以从瓶内出来就直接下地栽培,但管理要非常细心。

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