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山茶的组培技术与研究

时间:2019-9-25 浏览数:2702

山茶

一、植物简介

山茶花是山茶科山茶属植物,世界著名的花卉。山茶属植物约有200种,其中约有190种产于中国。山茶花在我国已有1400年的栽培历史,其花大、色艳、花形丰富,深受各国人民喜爱。山茶花是一种在初春开花的花卉,恰在我国的重大传统节日元旦、春节、元宵节等期间开放,而且花期较长,由不同品种构成,花期可从9月到翌年4月。同时山茶花又是一种常绿植物,它的叶片四季常青,单片叶片的寿命可达4年。因此,山茶花在我国园艺中占有较为重要的地位。

二、有效的培养方法

1、培养基配方

诱导及分化培养基  MS+BA 3mg/L+IAA 1mg/L

增殖培养基  MS+BA 2mg/L+IBA 0.01mg/L+ZT 2mg/L+2ip(异戊烯基腺嘌呤)2mg/L

生根培养基  MV+蔗糖15~20g/L

在山茶花的组织培养中,进行诱芽培养及增殖培养时采用MS为基本培养基,生根培养时采用低浓度无机盐的MV为基本培养基效果较好。MV培养基的组成:KNO3 80mg/LCa(NO3)2·4H2O 150mg/LMgSO4·7H2O 350mg/LNaH2PO4·H2O100mg/LKCI 65mg/LNa2SO4 200mg/L+MS培养基的微量元素、铁盐、维生素。

2、培养程序

1)取材  将山茶花种子播种于花盆中,然后将花盆放在温室中促其发芽,4~5个月后取其茎尖;或取已有一定树龄的山茶花枝条嫩梢的茎尖,一般以3~5月份,当嫩梢抽出不久,叶还未展开的材料为好。

2)灭菌  将茎尖取下后,取带2~3个节的顶芽,剪除叶片和苞片,用自来水冲洗干净,经75%酒精浸泡30~60s,再用0.1%升汞溶液消毒8~10min,无菌水洗4次,然后切取茎尖,接入诱导培养基。

3)生长及分化  茎尖1周后开始膨大,生长点开始伸长,5~6周后在其基部周围逐渐形成簇状丛生芽。当芽丛高达3cm左右,具4~6片叶时,将其分切成单芽,转接到增殖培养基上继代,培养6~7周后,芽可高达8~10cm,具有10个左右的茎节。为了增殖无性系,可将其切割成带茎节的切段,每个芽条可分割成8~10段,供继续增殖培养,这样可获得大量无性繁殖系。据有关报道(应承继等),山茶花的繁殖周期为1.5个月,理论上,年增殖数可为88

4)生根培养  在进行增殖培养的同时,可选择粗壮的芽条进行生根培养。

三、质量标准及调控技术

实验结果表明,在诱导芽阶段,多芽的形成以BA的活性最高,其次是KTZT促进芽条生长粗壮的效果较明显。BA在较低浓度(1mg/L)下与生长素(IAANAA)配合,只诱导芽的萌动和生长,一般只诱导出单芽,少数产生2个芽;当BA在较高浓度下(3~5mg/L)与生长素适当配合,则可诱导产生多个芽。在一定浓度范围内,多芽体的产生与BA的浓度成正相关,但芽的长度随浓度增高而减少。从诱导的芽数目和长度看,以BA 3mg/LIAA 1mg/L配合,形成多芽体效果最好。平均每个外植可产生8~10个芽(最多可达20个)芽的长度一般在5~6cm,当BA浓度高于5mg/L时,虽然芽的数量更多,但呈密集的簇状,芽长度短,叶子很少能展开,生长较慢。

实验还表明,不同年龄母树的外植体对激素的反应不同。成年树外植体的芽发育和多芽的形成所需激素种类和浓度与幼苗外植体不同,除在培养基上加BA外,另添加ZT1~2mg/L,并以NAA代替IAA,对成年外植体产生多芽体效果更佳,多芽体发生频率为50%以上。

另据报道(谭文澄等人)在培养基中添加水解酪蛋白和聚乙烯吡咯烷酮(一种抗氧化剂),对山茶的芽分化、胚状体形成有良好影响,能使分化率提高,速度加快,胚状体发育正常,聚乙烯吡咯烷酮还有抑制愈伤组织形成而不影响苗芽分化的作用,这对茎尖培养是很重要的。

木本植物在组织培养中普遍存在生根难的问题,山茶花尤为突出。经过一系列的实验,庄承纪等人(1997)采用“浸没-纸桥生根法”诱导根的发育,取得满意的结果,生根率大大提高,根的数量多,生根的时间短。将供生根的芽条基部用IBA0.5g/L浸没处理20min,然后转到MV液体培养基的纸桥上在弱光下诱导生根,效果极佳,14d可见生根,每条芽的平均根数也较多,后期根的生长正常。将生根植株移栽入土后观察到生长正常,并已开花。

关于培养基中蔗糖浓度及无机盐浓度对山茶花生根的影响,目前一些实验结果不很一致。有报道说1.5%~2.0%蔗糖对山茶花的生根效果最好,低浓度无机盐的MV培养液对生根效果较好,全量MS培养基生根率显著减少。

不同品种的山茶花之间,甚至同一品种的不同部位作为外植体时,芽的增殖率、生根率以及芽和根的生长规律都可能有显著的差异,从而在不同情况下的培养过程也会有所不同。最佳的组培方案,应是在生产实践中不断总结制定出来的。

四、出瓶苗的过渡管理

要保证较高的移栽成活率,应做到三点,即健壮的幼苗、适宜的栽培基质和保持高湿度。对健壮幼苗的要求是生长良好,根系发达,先决条件是根与茎的维管束相联通,根不是从愈伤组织中间发生,而是从茎木质部上发生的。

当幼苗在培养瓶中根长到1~1.5cm时,即可进行移栽。将出瓶后的幼苗用水洗去基部的培养基,移栽至以蛭石为主,PH值为6~6.5的混合基质中。移栽前期,要将空气湿度保持在90%以上,遮光率为50%,环境温度控制在25~32℃。需特别注意的是山茶花的幼苗对光照有较广泛的适应,从2500~7200lx都能成活。需特别注意的是山茶花的过渡苗对湿度要求严格,要保持高湿度又避免在浇水过程中出现根部积水因通气不良而引起烂根死亡,应在过渡管理中采用自动控制间歇喷细雾或用喷雾器人工喷雾,保持叶面和空气湿润。一般约17~20d后新根就会生长,单株根数、根长及总根长等都有显著增长,为下一步移栽提供了基础。



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