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牡丹的组培技术与研究

时间:2019-9-24 浏览数:8727

牡丹

一、植物简介

牡丹是牡丹科芍药属落叶灌木。植株高可达2m,叶互生,羽状复叶;嫩梢红紫或绿色,一般与花色有相关性;花形硕大,花径常达15~20cm,单瓣至重瓣;花色有白、粉红、黄、红、紫、淡绿及白花基部具红晕等,花期4~5月。原分布于不丹、我国西藏及国内其他山区,现世界已广为栽培。牡丹是我国特有的名贵观赏、药用植物,栽培历史悠久,品种繁多,花冠硕大,花姿端丽,色泽鲜艳,气味芳香,雍容华贵,素有“花中之王”、“国色天香”之美誉,深受国人喜爱。在国花评比中,是首推候选国花之一的名花。

二、有效的培养方法

1、培养基配方

诱导及增殖培养基  MS+BA 1mg/L+GA3 0.5mg/L

生根培养基  1/2MS+IBA 1mg/L

2、培养程序

1)取材及灭菌  取牡丹2月份的休眠芽,在自来水下将其表面冲洗干净,先用75%的酒精消毒30s,再用0.1%升汞溶液浸泡消毒10min,用无菌水洗6次后,剥去休眠芽外 的芽鳞和鳞片,切取5mm长的茎尖接种到诱导培养基上。

2)生长及分化  茎尖在诱导培养基中经20d左右便可萌发并产生不定芽。将产生的长至0.5~1cm的幼芽切割后在相同配比的培养基中进行继代增殖培养,小芽可继续长大并有一定数量的丛生芽增殖。

3)生根培养  当小芽长至2cm左右高时,即可将其分切成单株,在生根培养基中诱导其生根。一般经过20d的培养,就能形成带根系的再生植株。当小苗已有根的生成时,即可揭去培养盖,在培养室中放置2~3d,然后将小苗出瓶移栽。

三、质量标准及调控技术

在牡丹的组织培养中,取用不同时期的外植体对培养结果有一定的影响。试验表明,2月份取经过冬季低温的休眠芽作为外植体进行培养,不仅成活率和分化率高,而且萌动早,生长迅速,植株健壮,无畸形;而8月份和11月份取的休眠芽,萌芽缓慢,叶片微黄,生长瘦弱。3月份取萌发条进行培养,污染和褐变死亡现象严重,成活率很低,难以分化。因此,牡丹芽培养的适宜材料是休眠芽,休眠芽取材的最佳时间是2月份,尤其是取休眠后期即将萌动的芽作为外植体最适宜。

不同品种的牡丹,在2月份取材的休眠芽,均能在诱导培养基中增殖和生长,但分化率和增殖倍数不同,新梢的生长状况也有差异。改良的MS培养基(MS的大量元素减半,烟酸1mg.L,维生素B61mg/L,维生素B2 5mg/L)的效果优于MS培养基。试验结果显示,在培养基中单加BA,即可促进牡丹芽的增殖和生长,加入少量的NAA后,虽然提高了增殖培数,但刺激了愈伤组织的形成,不利于芽的分化和生长,而加入CA3后,对牡丹芽的增殖和生长均有一定的促进作用。IBA促进小苗生根的效果优于IAA,用IBA诱导生根,根部形成的愈伤组织少,生根数量多,生根率高。而用IAA诱导生根,生根率低,生根数量少,且由愈伤组织少,生根数量多,生根率高,而用IAA诱导生根,生根率低,生根数量少,且由愈伤组织分化形成的根比IBA多,移栽时易断根,苗成活率低。在相同的培养基中不同牡丹品种,因分化根的难易不同生根率有所不同。

四、出瓶苗的过渡管理

将已生根且经过室内锻炼的小苗从培养瓶中取出,洗去根系上附着的培养基,移栽到以蛭石或腐殖土为主的基质中,一般移栽温度为15~20℃。开始几天用塑料薄膜适度保湿。以后逐渐除去,基质用1/4MS无机盐营养液浇灌。用经高温灭菌的腐殖土作基质,在15~20℃的条件下,其移栽成活率比蛭石做基质提高12%,并且在腐殖土中,移栽苗的生长也比较健壮。目前报道的牡丹组培苗的移栽成活率均较低,最高的也仅有48%



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