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一个袖珍组培室(组培爱好者家庭适用)

时间:2019-8-5 浏览数:1006

一、最必需的物品

1、.家用高压锅 1个最好大一点的,装的东西多一点。用于培养基、无菌水等的消毒。(这个东西家家都有,可能不需要买吧?)

2、接种箱 (无菌箱)1个 ,需要自己自制,用一些木板和一块玻璃和二尺布料。大约需要50元钱。用于接种和转移。

3、药用天平1架 最好是500g称量的,小一点也可以 
,大约100元,如果口袋里钱不够,就去药店你买一个称中药用的戥子,选称量100g的,最多只要10元钱。主要用来称琼脂、糖等物品。

4、不锈钢锅或铝锅(煮汤、面条的那种)这个家家都有的,可以不去买。用于煮制培养基用的。

5、搅拌和分装培养基用的调羹一个,就是在学校吃饭用的那种长柄的,用于煮制和分装培养基,如果没有买一个也要不了几块钱。

6、培养用的瓶子若干,可以去买现成的,200ml带盖的0.60元一个,我最喜欢使用的就是医院里丢弃的200ml的盐水瓶,又经用又经济,不要钱。

7、制棉塞用的棉花、纱布和线若干,用于做瓶口的塞子,要注意的是,棉花要使用普通做棉衣的棉花,不要用医院用的脱脂棉,这样容易穿塞污染。

8、牛皮纸、橡皮圈若干,用于包瓶头和扎包头纸用,牛皮纸可以去找用过的包装纸,橡皮圈一元钱买一大把。

9、酒精灯1盏、解剖刀1把,刀片若干、镊子2把、10ml、100ml量筒各一个,2ml移液管1只、药棉若干。可能一起要不了100元钱吧。

你只要有了以上器械就可以准备工作了,朋友们会问没有药品怎么办,下面我就说说这个问题。

二、怎样解决蒸馏水和基本药品

培养基的用水在一般人的心目总是觉的十分重要的,其实是多余的担心。冷开水、清洁的河水都是给以用的,并不影响培养的效果。市场上出售的纯净水更是一般培养激理想的用水。最常用、最必要、用量最大的只需购买以下几种就行了。

1、MS培养基的大量元素(家庭或所谓袖珍组培室的培养一般采用MS基就可以了。)共5种。1、硝酸铵(AR500克)14.00元 
2、硝酸钾(AR500克)14.00 3.氯化钙(AR500克)12.50元 4、 硝酸镁(AR500克)15.00元 5、 
磷酸二氢钾(AR500克)17.00元

以上小计:72.50元

2、酒精(普通500ml)5.00元

3、精密试纸(PH 5.4-7.0)一本 2.00元 (使用时间成小块,可以用很长的时间)

4、漂白粉或漂白精(500克)5.00元

5、琼脂(普通500克)35.00元

6、白糖(食用500克)2.50元

7、福尔马林(500ml)5.00元

8、高锰酸钾(100克)2.00元、(可以到医院或药材商店去买)

9、微量元素、铁盐、维生素类以及激素类药品应用量极少,在家庭或袖珍组培室没有精密的称量设备,是解决不了的,但是我们可以向《大众花卉》《花卉报》和〈中国花卉盆景〉等组织邮购的单位邮购。有很多的试剂也可以通过医院或医药门市去购买的,比如一些激素、维生素类的药品及有针剂也有片剂,他们都有比较准确的含量,你可以去按你的需要去配制比例。

低成本家庭简易组培介绍 2009-9-7 访问次数: 4267

(一)必须的设施物品及代用品

1、代用品

家庭用的电冰箱,可用于贮存培养基母液(4℃)及需低温贮存的药品(如生物调节剂)。

高压锅:它可用于培养基、无菌水、玻璃器皿及其他组培用具的消毒灭菌。如所用水硬度大可用凉白开水,进行消毒灭菌。避免被消毒灭菌物品表面结垢。

不锈钢锅或铝锅:它可用于培养基、溶化琼脂(起水浴锅作用)及组培用具消毒灭菌。

刷净的废弃食油桶:它可以用来贮存蒸馏水。

小白瓷碟:可以用于接种及盛放消毒液(若放消毒液,就不要再食用,以免中毒)。

日光灯:它可用于组培过程中光源补充。

洗净废弃的罐头瓶:它可以用于组培培养之用,代替锥形瓶、试管。

组培场地可在自己的房间内进行。在配制培养基和接种时,不要赶在家庭成员较多时进行,如室内已安装了空调,那么在初代培养和继代培养、乃至小苗过渡时均有好处。

2、自制用具

(1)接种箱的制作:组培过程中的超净工作台是很贵重的设备。如果我们用自制的接种箱来代替,就可以大大节省开支,有利于普及。

自制的接种箱的用料,可以是胶合板、纤维板、玻璃(3毫米厚)、木条(装修房屋用的龙骨),甚至可以用使纸板的包装箱(包装箱的质量要稍好一些的,如电视机的包装箱),也可以用有机玻璃。

其接种箱的大小,可以根据各自的家庭条件制作。制作太小不便于操作,但相对来说消毒容易,且占地较少;制作较大的便于操作,但消毒工作显得不易,且占地面积较多。一般来说作成70厘米长、45厘米宽。50厘米高较为合适。

(2)培养箱的制作:培养箱可代替培养室,也可以用于过渡苗使用。它可以用玻璃制作,或利用长方形鱼缸。因此,可用玻璃粘结制作。其大小可按自己家庭居室面积和组培的量来决定。

3、需购置用具

普通天平(500克):用于称量配制培养基药品,或用称量金银、中药的戥子称,用于称量配制培养基药品、微量元素及生物调节剂;或购买微量元素及生物调节剂时,买已分装的。酒精灯1盏:用于接种时,灼烧消毒灭菌。漏斗(亦可用购买桶装食用油,所配给的漏斗):用于分装培养基用。长镊子2把:用于接种。解剖刀2把、刀片若干:用于接种。10、50、100毫升量筒各1个:用于配制培养基用。长把牛角勺2把:用于配制培养基取药品。1、2、5毫升移液管各1个:用于配制培养基用。

耐高温塑料膜或牛皮纸:用于包扎培养瓶口及表糊自制接种箱内部棱角处。橡胶圈:用于绑扎培养瓶口。脱脂棉:用于操作人员及组培用具酒精棉球消毒。pH(5~7)试纸1本:用时可剪成小条检测培养基pH值。酒精1瓶:用于酒精灯及消毒。漂白粉1瓶:用于消毒。福尔马林1瓶:用于接种箱消毒(在每次操作前2~10小时,将10~20毫升福尔马林倒入小白瓷碟内,在操作前取出)。MS培养基所需药品;用于配制培养基。盐酸及氢氧化钠:用于调pH值。如若购置1盏紫外灯,进行室内及接种箱消毒更为理想。

(二)操作时注意事项

家庭操作与单位不同,因而要注意以下事项:要注意安全,妥善保管药品。特别对老人和小孩;操作时要消毒仔细严格,接种时操作人员戴好口罩、工作帽,避开电风扇及大风沙天气,家庭成员多时避免操作;消毒前后避免家庭所养宠物进人工作间;药品称量要准确无误;如果家庭不具备温度调控(如调温空调),应避免在盛夏、寒冬进行;红掌组培要一步步来作,可先作容易组培的花卉,待取得经验后再做难作的花卉。

家庭组织培养建议之场地和设备 2009-9-7 访问次数: 3990

爱好者在家庭环境下进行组织培养的探讨与建议植物组织培养技术,尤其是快速繁殖,并非只有专业人员和专业实验室才能够完成的。作为对多肉植物和组织培养有着浓厚兴趣的爱好者,在充分利用家庭条件的基础上,同样可以制备出自己的试管苗来的。在我们进行多肉植物的栽培中认识到,一些比较名贵的园艺品种,比如:万象、玉扇、寿、高纹鹰爪等十二卷属品种,还是缤纷橄榄、何鲁牵牛等块茎类植物,甚至于星球属、岩牡丹属等等,这些植物的常规繁殖系数很低,他们都可以采用组织培养来解决其繁殖问题,并且可以得到相当数量的幼苗。对于奇想天外等种子萌发困难的植物,同样可以借助组织培养来进行无菌播种。在进行组织培养过程中,不但可以对培养的植物有更深一层的认识,对常规的栽培有着相当大的意义。许多搞组织培养的专家,最初都不是专业学组培的,就是凭着兴趣和探索精神取得辉煌成绩的。关键是,爱好者有着浓厚的兴趣,非凡的观察力和细致入微的操作,这些都可以弥补非专业的缺陷,并且可以充分利用日常生活中的各种可利用资源,这些就足以让爱好者在家庭环境下完成组织培养了。同时这也不仅仅满足了自己的兴趣,还可以有一定的经济收益,甚至可以有所创新和发明。

一、如何解决场地和基本设备:

进行组织培养,没有一定的设备是无法开展的。正规实验室的组织培养设备是昂贵的,不适合家庭消费,但如果能有途径买到廉价的实验室设备,那就在好不过了。如果没有办法搞到实验室设备,就不妨动手自己制作一些简单的设备。

1.无菌操作的主要设备——接种箱和压力锅:

接种箱:植物组织培养的主题操作需要在一个相对密闭的无菌环境中进行。那么说我们首先要创造一个密闭的环境,可以利用一些木料、塑料板、有机玻璃、铝合金骨架等等廉价的材料,动手粘合一个小巧的接种箱。具体的参数可以找一本“食用菌栽培”的书籍,模仿种蘑菇的接种箱做一个即可。需要注意的是,组织培养的接种箱的密闭性要求比较高,尽量避免腐朽的木材和易生锈的材料,箱子的顶端按放两盏灯:20w的紫外线灯和20w的日光灯。箱体的周边尽量采用玻璃材料,因为这样便于观察,有时候接种箱还可以借用为培养箱,周边采用玻璃材料更方便于观察和培养。
高压锅:主要用来对培养基和其他材料的灭菌。在实验室通常使用医用高压灭菌器,然而在家庭要充分利用厨房使用的高压锅,高压锅的压力要低于灭菌器,但是适当延长灭菌时间,还是可以取得较好的效果的。比如:对培养基灭菌40分钟就基本上可以达到灭菌效果(灭菌器是20分钟);无菌水采用间歇灭菌法,先用高压锅压40分钟,放置24小时,再压20分钟即可达到效果。

2.场地:
这个就因人而易了,总体的要求就是进行组织培养操作的地方要尽量无尘,减少空气流动,最好有一定的阳光。比如书房、写字间都可以用来进行无菌操作。
进行培养基的配制可以借用一下厨房,但所使用的器具必须和厨具分开。一般说,组织培养中的几乎全部化学物质对人体是无害的,除了少数激素类物质和灭菌剂。对于有毒害的物质,需要认真保管,以免发生危险。

3.辅助设备:
主要指冰箱,它是用来储存化学物质和培养基的。天平,可以采用感量在100克的托盘天平,甚至用中药的药衡都可以代替。培养架,这个就更简单了,采用铝合金-玻璃的培养箱既可以满足要求,如果日光不足,可配合日光灯补光等。

4.化学试剂:

化学试剂是不可缺少的,因为组织培养的核心就是培养基的成分,而并不是简单的无菌操作。一些用量较大的化学物质是有必要买的,比如大量元素(硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙等)、高锰酸钾、甲醛、酒精、白砂糖、琼脂等等。微量元素和有机复合物不需要购买,因为它们的用量很小,我们可以用蔬菜浸汁或者马铃薯浸汁来代替。激素是必不可少的,他们的称量需要借助分析天平,但这是家庭条件所不允许的,如果有条件可以借助关系单位代替配成母液,每次取一些使用即可。最好的办法是到农资商店(卖农药化肥的地方),它们一般出售农业用的激素,有的是用安瓿装的,按照一定的比例加入到培养基当中即可。近几年来,有些化学品公司开始生产植物组织培养基原粉,只需要称取一定量加水即可,很方便。比如泛生化学品公司生产的ms原粉,只需要称量40克,加1升水,用微波炉加热5分钟即可分装,相当简便。
消毒剂通常采用氯化汞(剧毒),如果不容易搞到,可以用漂白粉代替。
调节酸碱度时,可以采用家庭常用的纯碱和白醋。

5.培养容器和玻璃仪器:
组织培养的容器要求并不高,只要玻璃颜色为透明色即可(钠玻璃不可以)。
我们可以到垃圾站去看看,捡回一些废旧的果酱瓶就可以了。比较好用的是阿香婆辣酱瓶,我们实验室也是采用的这种瓶子。瓶子的封口膜采用聚丙烯塑料即可,如果不好找到,可以采用微波炉专用的锡箔纸甚至方便面的袋子,折叠成双层,用橡皮圈固定即可。
其它玻璃仪器,比如烧杯、玻璃棒都可以用家庭的杯子和筷子代替;一些度量仪器,如量筒和移液管最好到玻璃仪器商店购买,恐怕花不了20元钱就可以配置一套相当棒的组培玻璃仪器。

6.其它:
还有一些用品是必需的。比如精密ph试纸(5.4~7.0),需要买一本,大约花1.5元即可搞定;酒精灯也不需要买,用墨水瓶配上一个玻璃环,再加上一个棉花芯,最后用农夫山泉矿泉水的瓶盖做灯冒,这样的酒精灯很小巧,适合接种箱使用。刀子剪子镊子是必需的,到花市的工具摊位上,花10元钱全部搞定,注意选比较小巧的工具。
关于用水,按理说应该使用蒸馏水,但是我们家庭饮用的纯净水比蒸馏水还要纯,那么说借用一些饮用水就可以了。我们曾经采用康师傅纯净水进行动物细胞的培养,效果都是很不错的,更何况于植物细胞培养了。

以上是组织培养的基本设备和试剂,主要突出了他们相关的替代品,因为作为组织培养中的快速繁殖,它的要求是相当低的。我们的家庭培养和工厂化是不同的,工厂化生产组培苗要追求高增殖率,所以它的要求就比较精细和标准。我们的家庭培养则不需要那么准确,只要达到培养成功的目的即可。当然,如果想提高增殖倍率和试管苗的品质,必须尽量贴近实验室的用具和器材,代用品总是有一定的缺陷的。
家庭组培技术之春兰组培快速繁殖 2009-9-7 访问次数: 3165

⑴、建立小型家庭组织培养室,自制设备。众所周知该项工作要在无菌条件下进行。为此,必须研制密封良好的玻璃接种箱、净化空气装置,采取种种技术措施,以降低转瓶污染率。用酒精喷雾降尘,成功率上升为92%,这就给筛选最佳培养基配方赢得了时间,奠定了良好的基础。

⑵、无菌操作。所有接触培养基、能耐高温的器 用干热法(140~150OC)处理,对不耐高温的器具采用化学方法灭菌消毒。为解决接种时需要在火焰上进行的问题(因箱内几乎无空气),增添了一只300瓦的电炉,但因温度高易灼坏外植体,故又加设了通风降温的设施。为了减少刀具第二次在环境中污染,高温消毒后安放在一端封闭的筒内,同时不断鼓入净化的空气加以冷却,确保外植体安然无恙地进入营养基瓶中。所有进入箱内的物品均需酒精消毒后才放进,凡是带菌者不许入箱。箱体消毒程序是酒精喷雾后紫外线消毒,并定期用甲醛加高锰酸钾进行熏蒸.。

⑶、选用适宜的培养基配方。诱导一分化一生根均采用MS基加萘乙酸、细胞分裂素。但不同的生长阶段还需做成分上的调整,特别是生根时,由于兰花生根较其他品种花卉难些,故采用高浓度的NAA浸泡数秒的做法,效果良好。

⑷、外植体的采取、消毒。外植体以长根的幼苗(未展开叶),随采随接种,成活率较高(接种时节以10月至次年2月最好)。外植体消毒,笔者采取0.1升汞加0.1%浓盐酸多次消毒的办法,效果更佳。

⑸、培养环境。光照1000~2000勒,10~16小时,培养温度26OC±2 OC,空气温度应控制在较低的水平(70%~80%),否则极易再一次污染。

①、在家庭中建立小型组培室是可行的,它的投资少(可充分利用家中的条件)。从筹备到进行实验只花去数百元,该实验设备也可用于开展其他品种(如木本、药用植物等)的研究工作。

②、无菌操作必须从思想上重视,操作上谨慎才是,否则损兵折将,后果不堪设想。

③、若无实体显微镜,只能做以芽生芽的实验。采取一些措施如分期切制切样品、液体加旋转床的方案,是取得大批量类原球茎的一种途径,其繁殖速度也会有所突破。

文章选自 中国兰花交易网

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