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试管外生根

时间:2018-12-11 浏览数:249

有些植物种类在试管中难以生根,或有根但与茎的维管束不相通,或根与茎联系差,或有根而无根毛,或吸收功能极弱,移栽后不易成活,这就需要采用试管外生根法。从形成的嫩茎上切取插条进行试管外生根是一项降低成本的有效措施,它不但减少了试管生根而需要无菌操作的工时耗费,也减少了一次培养基制作的材料及能源消费。切割下的插穗可用生长素类粉剂或适当的溶液浸蘸处理,所用浓度应当预先小批量试验确定。
已证明杜鹃嫩茎在试管内或在试管外生根的效果都同样好(Kyti和Briggs,1979),此外,越橘、南美稔(Feijoa)等植物的嫩茎在试管外生根远比在试管内好。在不灭菌的条件下,1cm的银毛球(Msmmillaria elongata)嫩茎可以百分之百的生根。有些植物需要接植在生根培养基上一段时间,此后无论生根与否都可移植成活,如月季、香石竹等,但省去这一步却难以成功。王怀宇(1983)使菊的嫩茎在8-9月间,在广州的高温高湿条件下达到100%的生根。
试管外生根有以下三种方法:
1、在试管内诱导根原基后再移栽  朱鹿鸣等(1989)报道月季试管苗移栽时易发生机械损伤,成活率低,又不稳定。用有根原基的试管苗移栽既耐贮运,又能异地移栽,成活率还高(97%)。其方法是剪取丛生芽,转入MS+0.5BA+0.01NAA中待小芽生长,当长至3cm-4cm时,转入加有0.5NAAMS培养基中,培养7d-10d后,待嫩茎基部长出根原基后取出栽入营养钵中,5d-6d后自行生根,此根系有根毛,吸收功能好。此法不仅移栽成活率高,而且可缩短生产周期,还适于长距离运输。一个广口保温瓶可装1000株带有根原基的小苗,转运千里之外再进行移栽,实现苗木运输移栽的微型化。1984年他们用此法移栽50个品种月季试管苗,成活2万余株。此法简便、易行,不伤根又便于贮运。在楸树、猕猴桃、山楂等试管苗中也获得了成功。
2、在生根小室进行生根和炼苗  做一个生根小室,不用琼脂和蔗糖,而用透气又保湿的基质如泥炭、蛭石、珍珠岩、苔藓等,并要人工控制温度、光照、采用人工喷雾,雾滴要细,以提高空气湿度,又不致使叶面有水滴流出。把剪下长1cm-3cm的嫩茎转入生根小室,经3周-4周培养,即可产生发育良好,具吸收功能的根。其后再栽入温室,则易成活。国外杜鹃即用此法移栽。杜鹃花的嫩枝在试管内外都能很好地生根,而一种银球花长约1cm的嫩枝,切下栽入瓶外基质,比试管内根长的更好。生根小室效果好,条件易控制,但成本高,面积小。国外有些商业性实验室用自动化湿度调节系统,旋转培养,进行生根驯化,取得了良好效果,但因费用很高已不再使用(Preece和Sutter,1991)。
3、盆插或瓶插生根法  巴岩磊等(1986)为解决我国西北干旱地区杨树试管苗难以移栽问题,提出用盆插或瓶插生根法来简化生根和移栽,节省设备,降低成本,提高移栽成活率。其法是用罐头瓶或盆内装有泥炭或腐殖土与细沙,每瓶插入20株-30株无根苗,插入深度约为0.3cm-1.2cm,加入1/2MS+1.0-5.0IBA或LAA生根营养液,在一定温度、湿度及光照下培养,20d后长出新根,30d后二级根长至8cm-12cm时移栽,成活率高而稳定。甘肃农大葡萄脱毒研究组研制成功葡萄脱毒苗简易快繁技术,用废旧罐头瓶代替三角瓶,用蛭石代替琼脂,用去糖的GN营养液,瓶口用打了孔的膜包扎,当接入10株-12株二节无根小苗或一节带根小苗,半开放培养,经15d-20d培养能长4cm-5cm的健壮幼苗,即可栽入沙床。变三步炼苗为一步炼苗,大幅度降低成本,简化移栽过程,在较粗放移栽下也有较高的成活率,适用于葡萄试管苗的繁殖与移栽。
有些植物可以把试管繁殖的嫩枝当作微型插条,直接入土生根,也能成活。如Berbee等,Chalupa & McCowns,以及Amos(1981)将杨树、桦木和其他阔叶树试管繁殖的嫩梢,直接栽入泥炭和蛭石基质中,很快生根,并有很高的成活率。
英国格拉斯哥植物园全国秋海棠中心(1988),用无菌简易快繁技术对秋海棠叶进行离体繁殖获得成功,也是体外生根和驯化一步完成,还是在带菌条件下完成,认为在植物微繁殖及保存中有广泛的应用前景。

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