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开放组培技术流程

时间:2015-10-21 浏览数:3861


1、培养基制备室用75%酒精喷雾降尘,紫外灯照射20分钟。

2、琼脂溶解后,加入各种元素(大量元素、微量元素、有机物和铁盐)和激素,加热到沸腾后停止加热,定容。

3、加入抑菌剂,调PH,分装到培养瓶,封口时间不超20min。(建议及时封口保证成功率)

4、若用培养瓶作为培养容器,为了降低污染,可以高压灭菌,灭菌方法同传统方式,只是灭菌时间由原来的15min~20min,降到10min,也可以只对培养瓶进行灭菌使用,装入培养基后就不许再灭菌。若用一次性塑料杯,PE保鲜膜封口可以不经过高压灭菌。

5、接种室用75%酒精喷雾降尘,紫外灯照射30分钟,用75%酒精将接种台面和手擦拭,打开瓶盖,用已灭菌的接种工具,把外植体接种到培养基上,然后封口。

6、培养室要保持干净,可以经常用洁尔灭处理。生根阶段,可以在温室内培养,如果温室条件好,培养条件控制设施齐全,整个过程都可以在温室内进行培养。

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