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组培室设计基本规则上篇

时间:2015-6-29 浏览数:5644

    组培工厂应选址在安静、洁净、可避开各种污染环境的地方,才能减少操作污染,降低生产成本,确保工作的顺利进行。根据已确定的生产规模,设计组培生产车间时,要全面了解工作中需要哪些最基本的设备条件,以便因地制宜利用现有房屋改建或新建组培工厂,尽量做到合理布局。通常按组培生产程序先后,顺次安排成一条连续的生产线,主要包括培养器皿清洗;培养基的配置、分装、包扎和高压灭菌;无菌操作材料的表面灭菌和接种;进入培养室培养;试管苗的种植和前期管理等。较为理想的平面布置见文章后面的图3-1,3-2。

    一、清洗室

    要求具有耐酸碱的水池和排水口。每天都有大量的植物材料碎片、琼脂等东西堆积,因此排水口一定要安装过滤网,做到每天清洗检查,一是减少微生物滋生源,二是避免排水系统堵塞,带来不必要的麻烦。

    配有不同形状及大小的洗涤刷,如果有可能安装洗瓶机器,更能提高工作效率。 配备数个塑料箱盛装瓶子,将瓶放入箱内时,应倒立,这样可使瓶子自然干燥。

    二、培养基配制及灭菌室

    手提式高压灭菌锅2~3个,用于一些小型物品或急需用品的高压灭菌。

    组培工厂必须配备1至数台大型灭菌锅,直径40~50cm的不锈钢或铝锅2~3个,用于溶解琼脂或调制培养基,加热源最好采用煤气灶或用电。

去离子水发生器1~2台。

    干燥箱1台,用于器皿或急需用具的干热灭菌。

    大型工作台1~2张,用于培养基分装、包扎等。

    玻璃柜1个,用于放置药品等。

    试剂瓶、具刻度移液管、皮下注射器、量筒、搪瓷量杯、容量瓶、各式塑料瓶或塑料桶等易损品数个,更重要的是配备大量充足的培养瓶。

    三、检测及称量室

    PCR仪:可用于真菌和细菌性病原菌的检测和部分病毒病的检测。

    酶标仪:通过血清免疫技术(ELISA)进行主要病毒病的检测。

    双目显微镜、解剖镜:用于植物组织培养材料的形态发育及细胞观察。

    凹穴载玻片:用于细胞悬浮培养。

    载玻片和盖玻片:用于制作细胞和组织的显微制片。

    光照培养箱;用于不同种类植物培养方法或培养条件的研究。

    冰箱:用于贮存化学药品,培养基母液和植物材料等。

    低温冰箱:用于长期贮存培养基储备液,某些酶和椰子汁等。

    称量仪器:包括感量为1/10000的电子天平,感量为1/10的普通托盘天平,称量为1~5kg的台秤等,用于药品的称量配制和植物组织生长量的测定。

    水质及培养基检测仪器:包括pH酸度计、电导率仪或Ec值测定仪。

    细菌滤膜及其支座:用于对溶液进行过滤灭菌。

    四、无菌操作室(接种室)

    这是组培工厂的最核心和关键部分,是进行无菌操作的场所,如植物材料的消毒接种,无菌材料的继代,丛生苗的增殖或切割,嫩茎插植生根等。它也关系到污染率这项最重要的成本指标的高低,直接影响组培工厂的工作效率及经济效益。无菌操作室原则上宜小不宜大,要有缓冲间,以便进人无菌室前在此洗手、换衣、换鞋、预处理材料等。无菌室的地板和四周墙壁应尽可能光洁,不易积染灰尘,易于采取各种清洁和消毒措施。无菌室内要吊装紫外灭菌灯,用于经常照射灭菌。要安装空调机,保持室温在23~25℃,原则上无菌室的门窗应紧闭,保持与外界相对隔绝。无菌操作室内需要的用具如下。

超净工作台:用于进行无菌操作。

    室内小推车:用于运送培养物、培养基和各种器皿用具。

    酒精灯:用于灼烧各种金属用具。

    手持喷雾器:用于在超净工作台内或对其他物品喷洒酒精进行消毒。

    带盖螺口玻璃瓶:用于盛装无菌水,对植物材料进行表面消毒。

    大的钝头镊子:用于进行接种和继代、生根等操作。

    细解剖针;用于植物材料的解剖。

    解剖刀:用于切割植物材料。

    各种孔径的不锈钢筛网:用于分离太小不同的细胞团。

    低速台式离心机:用于沉淀细胞,以便确定沉积细胞的总体积或清洗原生质体。

    振荡培养器;用于植物材料的液体培养。

    血球计算器;用于细胞计数。

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